24小时热门版块排行榜    

北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
查看: 1879  |  回复: 5
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

cf_120

新虫 (初入文坛)

[求助] 帮我看看DNA琼脂电泳图吧,拖尾明显,没有主带呀。 已有4人参与

我用的是生工的柱式DNA抽提试剂盒,严格地按照实验步骤操作提取大鼠肝脏基因组DNA,加了RNase,1.5%琼脂电泳,100V约25分钟,80V继续30分钟,DNA marker是从250bp到10kbp,除了最左边的泳道是DNA marker,其他4条泳道都是抽提的基因组DNA,其中左边两条是液氮研磨,右边两条是室温下匀浆的。
问题是,按说未降解的基因组DNA的分子量应该很大,在10kbp的位置是不是应该有一条明显的条带?
而我的电泳图上,呈明显的拖尾现象,根本没有主带呀,是不是DNA发生了降解?而且在250-500bp的位置可以看到模糊的条带,这是RNA吗?
为了消除DNA酶的影响,研钵、离心管、吸头什么的全部高温灭菌过的呀。
会不会是柱式DNA提取试剂盒的问题?
请高手指点!

帮我看看DNA琼脂电泳图吧,拖尾明显,没有主带呀。
20141029 1.5.png
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wanjunfei153

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
kx444555: 金币+2, 鼓励交流 2014-11-07 11:35:41
看你的图片,不知道你的组织是否新鲜,还有就是配置的RNase A是否95℃煮沸过,还有就是样品用量不能太多,裂解一定要充分,注意好一些细节提取动物肝脏组织的gDNA是很简单的,希望楼主实验顺利!
4楼2014-11-06 15:21:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 6 个回答

wml20100762

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
kx444555: 金币+2, 鼓励交流 2014-11-07 11:35:34
产生弥散(smear)条带原因:1.合成cDNA的第一链产物含量过高2.PCR反应中引物过多3.循环数过多.4.退火温度过低5DNase降解DNA是产生的寡核苷酸片段产生的非特异性扩增.(摘录的希望对你有用)
2楼2014-11-03 21:22:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

fallout76

禁虫 (小有名气)

★ ★
kx444555: 金币+2, 鼓励交流 2014-11-07 11:35:37
本帖内容被屏蔽

3楼2014-11-04 09:51:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Beryl_xu

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
kx444555: 金币+2, 鼓励交流 2014-11-07 11:35:45
之前做实验的时候也老出现这问题,是因为我扩的基因AT含量很高,老郁闷了,时间就在PCR与电泳间浪费掉了。你这个基因GC和AT含量是怎样的?DNA没有那么容易降解的,我觉得是别的原因。确定提出了基因组DNA么?
5楼2014-11-06 15:51:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 材料与化工306分找调剂 +3 沧海轻舟e 2026-04-02 3/150 2026-04-02 14:20 by 诶我去
[考研] 材料调剂 +5 懒羊羊轻置玉臀 2026-04-02 5/250 2026-04-02 13:47 by 星空星月
[基金申请] 请问共同通讯和共同一作的认可度问题 10+3 psa1234 2026-04-01 4/200 2026-04-02 13:24 by psa1234
[考研] 一志愿厦门大学材料工程专硕354找调剂!!! +7 贝呗钡钡 2026-03-30 7/350 2026-04-02 12:19 by 1753564080
[考研] 319求调剂 +13 太容易1018 2026-04-01 13/650 2026-04-02 11:39 by Sammy2
[考研] 271求调剂 +15 勒布朗@ 2026-03-31 20/1000 2026-04-02 11:24 by Sammy2
[考研] 329求调剂 +8 miaodesi 2026-04-02 10/500 2026-04-02 10:24 by 不吃魚的貓
[考研] 11408 321分求调剂 +3 huchun12138 2026-03-30 4/200 2026-04-01 22:48 by guanxin1001
[考研] 285求调剂 +11 AZMK 2026-04-01 11/550 2026-04-01 22:40 by peike
[考研] 环境工程297分求调剂一志愿杭高院 +10 GENJIOW 2026-03-31 11/550 2026-04-01 21:38 by GENJIOW
[考研] 286求调剂 +16 PolarBear11 2026-03-26 16/800 2026-04-01 21:31 by 七度不信任
[考研] 调剂 +3 好好读书。 2026-04-01 3/150 2026-04-01 17:06 by zhouyuwinner
[考研] 一志愿华南师范361分,化学求调剂 +4 Nicole88888 2026-04-01 4/200 2026-04-01 10:08 by 唐沐儿
[考研] 材料与化工272求调剂 +25 阿斯蒂芬2004 2026-03-28 25/1250 2026-03-31 16:27 by hypershenger
[考研] 求收留 +8 1943443204 2026-03-28 8/400 2026-03-31 15:00 by -迷了路啊路
[考研] 0703化学 +20 妮妮ninicgb 2026-03-27 20/1000 2026-03-31 13:33 by 无际的草原
[考研] 吉大生物学326分求调剂 +3 sunnyupup 2026-03-31 3/150 2026-03-31 09:28 by longlotian
[考研] 105500药学求调剂,一志愿山东大学药学,348分 +3 gr哈哈哈 2026-03-28 3/150 2026-03-30 18:56 by 源_2020
[考研] 本科新能源科学与工程,一志愿华理能动285求调剂 +3 AZMK 2026-03-27 5/250 2026-03-28 16:19 by xxxsssccc
[考研] 一志愿南京航空航天大学材料学硕求调剂 +3 @taotao 2026-03-28 3/150 2026-03-28 10:26 by JourneyLucky
信息提示
请填处理意见