应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » RT-PCR为什么要进行两轮PCR？
51/1返回列表
查看: 2156  |  回复: 4
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

lialee22

木虫 (著名写手)

黑钻会员

[求助] RT-PCR为什么要进行两轮PCR？ 已有2人参与

RT-PCR
第一步是反转录得到单链的cDNA（1个循环）；
第二步是用F引物和通用引物（M13M4）PCR（30循环）；
第三部是用F和R进行PCR（30循环），得到目的基因。

喂猫不在得到cDNA之后，直接用F和R进行一次PCR，得到目的基因？喂猫要先用通用引物P？

求解！
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
诸事顺遂
1楼 2014-10-23 10:05:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

匿名

用户注销 (著名写手)
★ ★ ★ ★
lialee22: 金币+4, ★★★★★最佳答案 2014-11-20 18:45:35
本帖仅楼主可见
赞一下
4楼2014-10-27 23:32:01
已阅   申请MolEPI   回复此楼   编辑   查看我的主页
查看全部 5 个回答

匿名

用户注销 (著名写手)
★
感谢参与，应助指数 +1
lialee22(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-10-24 21:00:16
本帖仅楼主可见
赞一下
2楼2014-10-23 12:56:09
已阅   申请MolEPI   回复此楼   编辑   查看我的主页

lialee22

木虫 (著名写手)

黑钻会员
引用回帖:
2楼: Originally posted by 楚云猛 at 2014-10-23 12:56:09
你用的是两步法反转，第二步你确定是跑三十个循环么？应该是一个吧？

是30个。我没写错。我也不懂。直接用F和R不就好了吗？为什么要多一步出来。
赞一下 回复此楼
诸事顺遂
3楼2014-10-23 19:17:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lidonghong

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

1、合成一条cDNA链
2、利用通用引物合成不同片段的大小不一的DNA双链，其中就包含你的目的基因的模板链
3、目的基因的扩增
赞一下 回复此楼
生物化学与分子生物学
5楼2014-10-28 11:46:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 5 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭