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lialee22

木虫 (著名写手)

黑钻会员

[求助] RT-PCR为什么要进行两轮PCR? 已有2人参与

RT-PCR
第一步是反转录得到单链的cDNA(1个循环);
第二步是用F引物和通用引物(M13M4)PCR(30循环);
第三部是用F和R进行PCR(30循环),得到目的基因。

喂猫不在得到cDNA之后,直接用F和R进行一次PCR,得到目的基因?喂猫要先用通用引物P?

求解!
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诸事顺遂
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匿名

用户注销 (著名写手)


感谢参与,应助指数 +1
lialee22(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-10-24 21:00:16
本帖仅楼主可见
2楼2014-10-23 12:56:09
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lialee22

木虫 (著名写手)

黑钻会员

引用回帖:
2楼: Originally posted by 楚云猛 at 2014-10-23 12:56:09
你用的是两步法反转,第二步你确定是跑三十个循环么?应该是一个吧?

是30个。我没写错。我也不懂。直接用F和R不就好了吗?为什么要多一步出来。
诸事顺遂
3楼2014-10-23 19:17:15
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匿名

用户注销 (著名写手)

★ ★ ★ ★
lialee22: 金币+4, ★★★★★最佳答案 2014-11-20 18:45:35
本帖仅楼主可见
4楼2014-10-27 23:32:01
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lidonghong

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

1、合成一条cDNA链
2、利用通用引物合成不同片段的大小不一的DNA双链,其中就包含你的目的基因的模板链
3、目的基因的扩增
生物化学与分子生物学
5楼2014-10-28 11:46:36
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