应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » PCR得到单一条带后能不能不回收，直接酶切
51/1返回列表
查看: 2149  |  回复: 4
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

wu-ke-da

金虫 (小有名气)

学习的路上

[求助] PCR得到单一条带后能不能不回收，直接酶切 已有2人参与

PCR得到单一条带，没有二聚体，我能不能不回收，直接进行酶切回收？
      还有，进行双酶切是不是得保证buffer对两种酶的酶切效率是一致的？因为以前碰到过不同的酶对应不同buffer的酶切效率不一样，所以就必须得进行单酶切回收再单酶切，感觉有点麻烦。

PCR得到单一条带后能不能不回收，直接酶切
图片1.jpg
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
喜欢生物，所以想好好研究下去！
1楼 2014-10-21 20:47:27
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wu-ke-da

金虫 (小有名气)

学习的路上
引用回帖:
3楼: Originally posted by sun_in_night at 2014-10-21 22:59:41
其实是可以的。但是由于PCR产物中含有的体系于酶切不是最佳反应体系，所以可能影响酶切效率，这样就需要适当延长酶切时间以保证酶切效率。
并且直接酶切可能也会切断模板DNA，从而对后续实验造成影响，当然如果酶切 ...

哦哦，谢谢。
回复此楼
喜欢生物，所以想好好研究下去！
5楼2014-10-22 08:04:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 5 个回答

peterrjp

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
kx444555: 鼓励交流 2014-10-22 12:25:21
单一条带不代表没有杂质。毕竟PCR反应体系里加了那么多试剂。
赞一下 回复此楼
2楼2014-10-21 21:07:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

sun_in_night

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
kx444555: 鼓励交流 2014-10-22 12:25:24
其实是可以的。但是由于PCR产物中含有的体系于酶切不是最佳反应体系，所以可能影响酶切效率，这样就需要适当延长酶切时间以保证酶切效率。
并且直接酶切可能也会切断模板DNA，从而对后续实验造成影响，当然如果酶切后再切胶，就一般没问题了。

至于双酶切的问题，现在基本都有适于双酶切的buffer，找一个合适的就行。更别说有些公司的所有酶都用一个buffer的了。。。
赞一下 回复此楼
3楼2014-10-21 22:59:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cnzpli

金虫 (正式写手)
楼上正解

[ 发自小木虫客户端 ]
回复此楼
4楼2014-10-21 23:05:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 5 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 一志愿华南师范大学0702物理学305调剂 +4 念常安 2026-04-07 6/300 2026-04-08 22:53 by bljnqdcc
[考研] 368化学求调剂 +12 wwwwabcde 2026-04-07 13/650 2026-04-08 20:48 by LiuXingYu星星
[考研] 285求调剂 +12 AZMK 2026-04-05 18/900 2026-04-08 20:43 by 逆水乘风
[考研] 085600材料与化工301分求调剂院校 +27 刺痛jk 2026-04-06 28/1400 2026-04-08 16:16 by luoyongfeng
[考研] 305求调剂 +3 77Qi 2026-04-07 3/150 2026-04-07 23:18 by jp9609
[考研] 080500求调剂 +12 黄宇博 2026-04-06 12/600 2026-04-07 12:41 by upczlm1989
[考研] 286求调剂 +20 Faune 2026-04-06 20/1000 2026-04-07 11:33 by 诗与自由
[考研] 一志愿武汉理工大学080200机械工程308分，求调剂 +4 终不似从前 2026-04-05 4/200 2026-04-06 11:46 by 考研学校招点人
[考研] 求调剂 +10 chenxrlkx 2026-04-05 10/500 2026-04-06 11:31 by 猪会飞
[考研] 283求调剂 +5 baiiyu 2026-04-05 6/300 2026-04-05 20:35 by 啵啵啵0119
[考研] 调剂 +3 李广火 2026-04-05 3/150 2026-04-05 18:57 by 蓝云思雨
[考研] 数一英一274机械调剂 +5 星陨流霞 2026-04-04 6/300 2026-04-05 11:38 by arrow8852
[考研] 26考研调剂0710 0860 +9 补补不补 2026-04-03 14/700 2026-04-04 23:32 by 果冻大王
[考研] 320求调剂 +3 一样圆 2026-04-04 3/150 2026-04-04 22:29 by 啵啵啵0119
[考研] 293求调剂 +5 末未mm 2026-04-02 6/300 2026-04-03 15:20 by 王保杰33
[硕博家园] 求老师收留 +9 lllq123 2026-04-03 9/450 2026-04-03 13:48 by 呼吸都是减肥
[考研] 266分，一志愿电气工程，本科材料，求材料专业调剂 +9 哇呼哼呼哼 2026-04-02 9/450 2026-04-03 12:05 by 1753564080
[考研] 085600，320分求调剂 +6 大馋小子 2026-04-02 6/300 2026-04-02 21:54 by dongzh2009
[考研] 22408 266求调剂 +3 masss11222 2026-04-02 3/150 2026-04-02 18:11 by 笔落锦州
[考研] 能源动力 调剂 +3 不破不立0 2026-04-02 3/150 2026-04-02 12:46 by ffffjjjj
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭