24小时热门版块排行榜    

查看: 2392  |  回复: 4
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

wu-ke-da

金虫 (小有名气)

学习的路上

[求助] PCR得到单一条带后能不能不回收,直接酶切 已有2人参与

PCR得到单一条带,没有二聚体,我能不能不回收,直接进行酶切回收?
      还有,进行双酶切是不是得保证buffer对两种酶的酶切效率是一致的?因为以前碰到过不同的酶对应不同buffer的酶切效率不一样,所以就必须得进行单酶切回收再单酶切,感觉有点麻烦。

PCR得到单一条带后能不能不回收,直接酶切
图片1.jpg
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

喜欢生物,所以想好好研究下去!
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cnzpli

金虫 (正式写手)

楼上正解

[ 发自小木虫客户端 ]
4楼2014-10-21 23:05:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 5 个回答

peterrjp

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
kx444555: 鼓励交流 2014-10-22 12:25:21
单一条带不代表没有杂质。毕竟PCR反应体系里加了那么多试剂。
2楼2014-10-21 21:07:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

sun_in_night

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
kx444555: 鼓励交流 2014-10-22 12:25:24
其实是可以的。但是由于PCR产物中含有的体系于酶切不是最佳反应体系,所以可能影响酶切效率,这样就需要适当延长酶切时间以保证酶切效率。
并且直接酶切可能也会切断模板DNA,从而对后续实验造成影响,当然如果酶切后再切胶,就一般没问题了。

至于双酶切的问题,现在基本都有适于双酶切的buffer,找一个合适的就行。更别说有些公司的所有酶都用一个buffer的了。。。
3楼2014-10-21 22:59:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wu-ke-da

金虫 (小有名气)

学习的路上

引用回帖:
3楼: Originally posted by sun_in_night at 2014-10-21 22:59:41
其实是可以的。但是由于PCR产物中含有的体系于酶切不是最佳反应体系,所以可能影响酶切效率,这样就需要适当延长酶切时间以保证酶切效率。
并且直接酶切可能也会切断模板DNA,从而对后续实验造成影响,当然如果酶切 ...

哦哦,谢谢。
喜欢生物,所以想好好研究下去!
5楼2014-10-22 08:04:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[硕博家园] 售SCI一区文章,我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +3 EWi2p09MOOv8 2026-08-16 3/150 2026-08-17 16:35 by CBFiACZS7HAK
[博后之家] 售SCI一区文章,我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +4 6GojgJvkDudM 2026-08-16 7/350 2026-08-17 16:14 by CBFiACZS7HAK
[基金申请] 感觉是下周放榜了 +4 angus9576 2026-08-17 7/350 2026-08-17 16:11 by Vivilian
[基金申请] 时间戳变了,能看出什么问题? +4 基诺咪客 2026-08-17 4/200 2026-08-17 16:10 by Vivilian
[基金申请] 哪位老哥知道今年的国自然具体哪一天放榜? +12 Ldrop2023 2026-08-13 15/750 2026-08-17 15:02 by 小豌豆_发芽
[基金申请] filecode=后面第一个是大写字母 +7 wangze12014 2026-08-14 9/450 2026-08-17 14:59 by wangze12014
[考研] 售SCI文章,我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 EWi2p09MOOv8 2026-08-16 6/300 2026-08-17 14:02 by EYK67XJMj64E
[考博] 售一区SCI文章T0P,我:8O.551.O54,科目全,可十急 +3 6GojgJvkDudM 2026-08-16 4/200 2026-08-17 13:49 by EYK67XJMj64E
[基金申请] 今天系统多次维护,明天很可能放榜! +8 zju2000 2026-08-16 9/450 2026-08-17 12:20 by lmz0216
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章,我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 i7NFEVbjQMM5 2026-08-16 4/200 2026-08-17 12:10 by 4GBAYCdVQoK3
[考研] 售SCI一区T0P文章,我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 6GojgJvkDudM 2026-08-16 4/200 2026-08-17 11:46 by 4GBAYCdVQoK3
[基金申请] 时间戳又变了8-15 +13 archvillain 2026-08-15 25/1250 2026-08-16 20:13 by zhaosm1982
[基金申请] 2027广东省杰青 +3 奶牛小黑 2026-08-15 6/300 2026-08-16 20:07 by 奶牛小黑
[基金申请] 快农历七夕节了,轻松一下,男人悄悄话,女施主请不要进来。 +3 Tide man 2026-08-14 3/150 2026-08-16 17:47 by jurkat.1640
[基金申请] 咱们一起用铁证分析2026国家社科基金中标与否 +7 启萌科技 2026-08-12 26/1300 2026-08-16 12:35 by 启萌科技
[硕博家园] 读博的好处 +4 lnee 2026-08-11 4/200 2026-08-14 10:20 by ahsoarli
[基金申请] 重要来源:本周末出结果 +10 瞬息宇宙 2026-08-12 10/500 2026-08-13 15:46 by likettle
[基金申请] 不应该看fileCode +7 且听虎啸 2026-08-12 9/450 2026-08-13 14:27 by flydreamws
[基金申请] 2019年青年基金涵评意见,大家看看几个A,几个B? +11 Tide man 2026-08-11 11/550 2026-08-13 07:35 by 撸猫猫
[基金申请] 什么时候出结果,有咨询渠道??? +3 Tide man 2026-08-11 3/150 2026-08-11 17:54 by kudofaye
信息提示
请填处理意见