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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » DNA重组 » 关于去掉信号肽
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hajierlove

铜虫 (正式写手)

[求助] 关于去掉信号肽已有3人参与

表达蛋白，17kD左右，蛋白本身带有信号肽，做蛋白原核表达时必须切掉吗？不切掉蛋白活性一定降低吗？
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踏实
1楼2014-09-29 20:04:38
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蓝索道人

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
kx444555: 金币+2, 鼓励交流 2014-09-30 12:35:27
SP在活性蛋白中都是被切掉的，SP只是在蛋白合成中起分泌引导作用。所以在原核表达中SP序列通常不要！
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努力就有收获！
2楼2014-09-30 07:52:19
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aoaoshch

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
kx444555: 金币+2, 鼓励交流 2014-09-30 12:35:30
蛋白自身的信号肽只适用于自己的细胞，异源表达时应当去掉，改用适合于此表达体系的信号肽，当然胞内表达就不要信号肽了。如果不去除，可能会对蛋白活性产生影响，如果你的蛋白分子量不是太小，可以尝试一下。不过17kd的蛋白也就100多aa，太小了，建议重设引物去掉吧
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3楼2014-09-30 09:05:33
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hajierlove

铜虫 (正式写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by aoaoshch at 2014-09-30 09:05:33
蛋白自身的信号肽只适用于自己的细胞，异源表达时应当去掉，改用适合于此表达体系的信号肽，当然胞内表达就不要信号肽了。如果不去除，可能会对蛋白活性产生影响，如果你的蛋白分子量不是太小，可以尝试一下。不过1 ...

好的，谢谢
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踏实
4楼2014-10-01 09:38:27
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冷雁孤旅

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
总结了一下楼上两位的观点，说的都有道理，异源表达一般是不需要原来的信号肽的，如果换体系，的确是需要换一个适应该系统的信号肽，我补充一下有的信号肽除了引导作用还有一个作用就是保护蛋白质不受其他酶水解，“遮盖”部分酶水解位点，同时对蛋白的正确折叠是有帮助的。
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生命不息奋斗不止
5楼2014-10-01 21:06:39
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