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真核表达质粒构建
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本人近期用pcDNA3.1 myc/his A构建真核表达质粒,师兄建议在上游ATG前加上kozak序列,我查了kozak序列常用为GCCACC,但我设计引物是若全加入退货温度过高,我想只加入ACC三个碱基,不知可以,能否提高蛋白翻译效率。 其次我查目的基因上有一段信号肽,老师建议用pcDNA3.1 myc/his A构建真核表达质粒去掉信号肽,我不明白信号肽不是指导蛋白质的跨膜转移,为什么不用加信号肽。 请求高人指点。谢谢! 注明:我克隆的是人缘基因 |
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