| 查看: 1775 | 回复: 8 | |||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | |||
[求助]
Real time 加样问题！ 已有7人参与
|
|||
|
最近做real time， 用的10u的体系，加样顺序：（Sybr Green Master Mix+H2O（共7u））*n，加样；（引物Mix2u+cDNA1u）*n，混匀，加样。三个平行孔，结果三个孔的反应结果相差很大，Ct值差距最大为3！也就是说加样误差很大。加引物Mix时一样的引物没有换枪头，cDNA也一样，不知道有没有这样加的，这样会有多大的误差？ 如果引物Mix和cDNA分开加，又使加样过程很繁琐，不仅容易出错，个人觉得加1u cDNA，等加到最后一孔了，第一个孔的cDNA是不是会已经蒸发掉一些。。。 另外加完Sybr Green Master Mix和水后，再加引物和模板时是加的壁上好，还是直接加进反应液里？觉得直接加进反应液误差小，但容易有气泡，离心也难去除。 |
回复此楼» 收录本帖的淘帖专辑推荐
 QPCR 问题简答 |
» 猜你喜欢
不合理蛙科研实验中的趣事：实验器材的 “乌龙”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验中的趣事：和实验材料的 “斗智斗勇”
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有94人回复
-
蛋白质检测：精准分析，解锁生物分子的密码
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之小鼠实验：严谨设计，解析生命机制的重要载体
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之重金属检测：精准筛查，守护健康与环境的防线
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“蛙测重金属我背锅三千”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“鼠逃三次我发三篇SCI”
已经有0人回复
-
纳米粒度分析
已经有3人回复
-
林科院林化所招收材料与化工专业硕士，坐标南京
已经有0人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 哪位大虾帮忙分析一下real-time PCR的结果
已经有10人回复
- 请问一下关于real-time PCR的问题
已经有6人回复
- 细菌real time RT-PCR
已经有3人回复
- 请问pcr产物约为450bp的大小，可以用来做 real time RT-PCR吗？
已经有9人回复
- real time PCR 结果很诡异，求助高手啊！！！
已经有3人回复
- real-time 数据处理
已经有9人回复
- SYBR green 1 real-time PCR 结果分析
已经有4人回复
- Real-time PCR溶解曲线Tm值，是不是在不同的仪器上做出来的不一样？
已经有5人回复
- 荧光定量扩增效率问题
已经有6人回复
- 求助microRNA real time pcr结果分析
已经有4人回复
- RT-PCR实验操作过程中遇到的问题
已经有15人回复
- 关于Real-time RT-PCR原理、操作过程及应用
已经有13人回复
- 求助 real-time PCR 曲线弯折 问题
已经有7人回复
- Table中的阴影怎么加上去的？
已经有3人回复
- Real-Time PCR加样过程中的那些细节
已经有19人回复
- 请教real time pcr问题，谢谢！
已经有10人回复
- 关于real-time PCR温度优化的问题
已经有6人回复
- 【求助/交流】real-time 的两个问题。
已经有5人回复
wwjcas570
木虫 (著名写手)
- 应助: 31 (小学生)
- 金币: 1276.7
- 散金: 1572
- 红花: 12
- 帖子: 1504
- 在线: 329.8小时
- 虫号: 504031
- 注册: 2008-02-15
- 性别: GG
- 专业: 生物物理、生物化学与分子
8楼2014-09-28 18:21:50
2楼2014-09-26 15:13:31
陌路行客
金虫 (小有名气)
- 应助: 17 (小学生)
- 金币: 2138.6
- 红花: 2
- 帖子: 113
- 在线: 34.7小时
- 虫号: 615723
- 注册: 2008-10-02
- 性别: GG
- 专业: 生殖生物学
3楼2014-09-27 12:16:12
jurkat.1640
至尊木虫 (文坛精英)
- MolEPI: 1
- 应助: 908 (博后)
- 金币: 17151.2
- 散金: 1654
- 红花: 121
- 沙发: 41
- 帖子: 14520
- 在线: 2183.9小时
- 虫号: 514340
- 注册: 2008-02-28
- 性别: GG
- 专业: 病毒学
4楼2014-09-28 08:52:48
