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小不点yctc

新虫 (初入文坛)

[交流] 求助目的基因克隆表达问题 已有1人参与

我做的两个基因的克隆表达,现在已经成功连上了pET28a表达载体,正在做诱导表达。
我们这边一般都是等到菌长到0.6----0.7的时候加IPTG诱导。我构建的这两个菌实验过程中条件都是一样的,唯一的区别就是两个构建的基因不同。
其中一个37度长2个半小时左右可以长到0.6以上,另一个37度培养2个半小时培养基还是很澄清,大概要长3个半小时才能达到0.6,该实验已经重复了3遍,每次都这样,求助,为什么?是质粒的影响吗?还是感受态的影响啊?需要重新做化转吗?各位大神求指导
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super_mm

金虫 (小有名气)

感觉质粒不会影响细菌的生长速度的啊,是不是你保存的菌种浓度或者活力不一样,你可以试试把两种原始菌都划个线,挑单菌落一样的培养条件养起来之后再用来当种子试试
2楼2014-10-13 10:27:00
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