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cuiqianyi

铜虫 (小有名气)

[求助] 请各位帮我分析一下我提取的质粒出现的问题 已有4人参与

这段时间,我提取的质粒经过酶切后,图片中显示没有载体和目的片段,而是在Maker的下方出现很亮的条带,不知道怎么回事,请帮忙分析一下,

请各位帮我分析一下我提取的质粒出现的问题
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慢慢来,一切都来得及
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493260040

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★
感谢参与,应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香,分子生物期待你更多精彩。 2014-09-16 20:19:21
上样量太大了,你的质粒多大?上了多少?

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
2楼2014-09-16 15:09:47
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happydove

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与,应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香,分子生物期待你更多精彩。 2014-09-16 20:19:31
从图上看,最亮的条带上面好像还有条带,建议你点样量减少,胶的浓度合适,溴酚蓝指示剂跑到胶的中间位置,看看结果
3楼2014-09-16 15:21:10
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Neo2000

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
以前遇到过,你看到的是RNA

[ 发自小木虫客户端 ]
4楼2014-09-16 22:31:45
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cuiqianyi

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by Neo2000 at 2014-09-16 22:31:45
以前遇到过,你看到的是RNA

但是已经加过RNA酶了啊
慢慢来,一切都来得及
5楼2014-09-17 09:24:32
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cuiqianyi

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 493260040 at 2014-09-16 15:09:47
上样量太大了,你的质粒多大?上了多少?

这个和上样量没有太大关系吧,上样量大的话也是质粒切开的条带比较亮啊
慢慢来,一切都来得及
6楼2014-09-17 09:25:18
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Neo2000

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
5楼: Originally posted by cuiqianyi at 2014-09-17 09:24:32
但是已经加过RNA酶了啊...

很明显没除干净,你拿试剂盒提就不存在这种情况了

[ 发自小木虫客户端 ]
7楼2014-09-17 10:15:06
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MedicalElite

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
可能是提的质粒不纯,有DNA碎片

[ 发自小木虫客户端 ]
坚持、加油、幸福
8楼2014-09-17 12:23:54
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