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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 核酸提取 » 请各位帮我分析一下我提取的质粒出现的问题
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cuiqianyi

铜虫 (小有名气)

[求助] 请各位帮我分析一下我提取的质粒出现的问题 已有4人参与

这段时间，我提取的质粒经过酶切后，图片中显示没有载体和目的片段，而是在Maker的下方出现很亮的条带，不知道怎么回事，请帮忙分析一下，

请各位帮我分析一下我提取的质粒出现的问题
捕获.PNG
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慢慢来，一切都来得及
1楼 2014-09-16 13:34:17
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493260040

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香，分子生物期待你更多精彩。 2014-09-16 20:19:21
上样量太大了，你的质粒多大？上了多少？

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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2楼2014-09-16 15:09:47
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happydove

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香，分子生物期待你更多精彩。 2014-09-16 20:19:31
从图上看，最亮的条带上面好像还有条带，建议你点样量减少，胶的浓度合适，溴酚蓝指示剂跑到胶的中间位置，看看结果
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3楼2014-09-16 15:21:10
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Neo2000

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
以前遇到过，你看到的是RNA

[ 发自小木虫客户端 ]
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4楼2014-09-16 22:31:45
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cuiqianyi

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by Neo2000 at 2014-09-16 22:31:45
以前遇到过，你看到的是RNA

但是已经加过RNA酶了啊
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慢慢来，一切都来得及
5楼2014-09-17 09:24:32
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cuiqianyi

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 493260040 at 2014-09-16 15:09:47
上样量太大了，你的质粒多大？上了多少？

这个和上样量没有太大关系吧，上样量大的话也是质粒切开的条带比较亮啊
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慢慢来，一切都来得及
6楼2014-09-17 09:25:18
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Neo2000

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
5楼: Originally posted by cuiqianyi at 2014-09-17 09:24:32
但是已经加过RNA酶了啊...

很明显没除干净，你拿试剂盒提就不存在这种情况了

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7楼2014-09-17 10:15:06
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MedicalElite

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
可能是提的质粒不纯，有DNA碎片

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坚持、加油、幸福
8楼2014-09-17 12:23:54
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