| 查看: 3451 | 回复: 23 | ||
ufoloveshe铜虫 (小有名气)
|
[求助]
镍柱纯化蛋白，遇到史上最顽固的杂蛋白 已有6人参与
|
|
做了很久的镍离子亲和层析纯化蛋白，遇到了史上最顽固的杂蛋白，怎么除都除不掉。而且浓缩后观察，貌似还有增多的趋势，实在令人费解。咪唑浓度设计梯度，增加到50mM时候就有目的蛋白析出，因此洗杂缓冲液一直设定在25mM，但杂蛋白貌似和镍柱结合的很紧密，洗杂缓冲液洗不下来，最后都和目的蛋白一同下来了。请大神指教。 CYD浓缩后：M,原，浓缩管水洗液，缓，缓洗，25,25水洗，100,100水洗，胍2 (1).jpg  TPK浓缩后：M,胍前，缓，25,100，胍2，M，CYD25，CYD-EDTA,CYD溜总 (1).jpg |
回复此楼» 猜你喜欢
含氟糖皮质激素的外用抗炎利器醋酸氟轻松
已经有0人回复
-
阿莫奈韦（Amenamevir）：解旋酶-引物酶靶向分子的结构特征与合成路径全解析
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有221人回复
-
利瑞鲁单抗：靶向KIR的NK细胞检查点工具抗体，结构基础与科研应用全解析
已经有0人回复
-
Wnt-C59：PORCN靶向化学探针，Wnt信号通路阻断机制与科研应用全解析
已经有0人回复
-
Fexaramine：肠道限制性FXR化学探针，结构特征与信号通路研究全解析
已经有0人回复
-
NVS-STG2：靶向STING跨膜域的分子胶类激动剂，结构特征与寡聚化机制研究全解析
已经有0人回复
-
DOTA-GPC3肽（CAS 3066439-94-6）：双功能分子探针前体的结构特征与标记应用解析
已经有0人回复
-
科研用 TLR7/8 双激动剂怎么选？现货与质控要点
已经有0人回复
-
SEL120-34A HCl：CDK8/CDK19高选择性激酶抑制剂
已经有0人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 包涵体上镍离子柱纯化后，洗脱收集的液体中目的蛋白不见了
已经有10人回复
- 镍柱纯化His标签蛋白，洗脱不下来
已经有11人回复
- 请教，镍柱纯化蛋白后，镍柱上的咪唑用除去吗？
已经有6人回复
- 镍柱亲和层析纯化
已经有6人回复
- 蛋白过镍柱纯化，在用咪唑洗脱后需要做透析，透析怎么做？？？
已经有15人回复
- 纯化时蛋白一上柱就絮凝
已经有15人回复
- 求镍柱子纯化表达蛋白的具体步骤，注意事项！！！
已经有5人回复
- 镍柱纯化哪个牌子的好用点？
已经有12人回复
- 蛋白质的Ni柱纯化问题
已经有23人回复
- 镍化的磁珠纯化蛋白问题
已经有4人回复
- 镍柱纯化后的蛋白，上下翻转混匀时易聚沉，是容易氧化吗？
已经有4人回复
- 带HIS标签的可溶蛋白的纯化问题
已经有20人回复
- 关于镍柱纯化蛋白
已经有10人回复
- AMPK蛋白纯化问题讨论
已经有21人回复
- 关于带his-tag的膜蛋白镍柱纯化
已经有10人回复
- his标签蛋白纯化，不挂柱
已经有18人回复
- 镍柱纯化蛋白透析出现大量沉淀，请教
已经有18人回复
- 【求助/交流】关于his-tagged 蛋白纯化
已经有9人回复
- 【求助/交流】为什么镍柱纯化可溶性蛋白，电泳结果总是显示不纯呢？
已经有9人回复
- 【求助/交流】镍柱纯化的蛋白保存在-20度一个星期，拿出来都是沉淀？？
已经有19人回复
- 【求助/交流】镍柱纯化，洗不下来啊。。。
已经有25人回复
- 基因带六个his标签，蛋白纯化时为何挂不上镍柱
已经有26人回复
zhenxiangkai
金虫 (正式写手)
- 应助: 4 (幼儿园)
- 金币: 194.3
- 散金: 10
- 红花: 3
- 帖子: 334
- 在线: 130.4小时
- 虫号: 2205010
- 注册: 2012-12-25
- 性别: GG
- 专业: 生物大分子结构与功能
6楼2014-09-17 15:21:21
dongmings
木虫之王 (文学泰斗)
- 应助: 20 (小学生)
- 金币: 72971.6
- 红花: 6
- 帖子: 57340
- 在线: 987.9小时
- 虫号: 351746
- 注册: 2007-04-21
- 性别: GG
- 专业: 天然药物化学
7楼2014-09-17 15:55:15
忘记将来
木虫 (正式写手)
- 应助: 8 (幼儿园)
- 金币: 2511.3
- 散金: 506
- 红花: 2
- 帖子: 473
- 在线: 232.9小时
- 虫号: 815220
- 注册: 2009-07-24
- 专业: 生物化学
14楼2014-09-19 08:59:38
忘记将来
木虫 (正式写手)
- 应助: 8 (幼儿园)
- 金币: 2511.3
- 散金: 506
- 红花: 2
- 帖子: 473
- 在线: 232.9小时
- 虫号: 815220
- 注册: 2009-07-24
- 专业: 生物化学
15楼2014-09-19 09:00:54
ufoloveshe
铜虫 (小有名气)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 2297.8
- 散金: 20
- 帖子: 89
- 在线: 72.2小时
- 虫号: 1318109
- 注册: 2011-06-08
- 性别: GG
- 专业: 基因表达调控与表观遗传学
16楼2014-09-19 09:04:31
lpzl
木虫 (正式写手)
- 应助: 59 (初中生)
- 金币: 4125.1
- 红花: 2
- 帖子: 306
- 在线: 526.2小时
- 虫号: 2412684
- 注册: 2013-04-11
- 性别: GG
- 专业: 生物化学
2楼2014-09-17 09:14:20
3楼2014-09-17 11:00:22
忘记将来
木虫 (正式写手)
- 应助: 8 (幼儿园)
- 金币: 2511.3
- 散金: 506
- 红花: 2
- 帖子: 473
- 在线: 232.9小时
- 虫号: 815220
- 注册: 2009-07-24
- 专业: 生物化学
4楼2014-09-17 13:03:06
5楼2014-09-17 13:35:56
ufoloveshe
铜虫 (小有名气)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 2297.8
- 散金: 20
- 帖子: 89
- 在线: 72.2小时
- 虫号: 1318109
- 注册: 2011-06-08
- 性别: GG
- 专业: 基因表达调控与表观遗传学
8楼2014-09-18 14:00:15
ufoloveshe
铜虫 (小有名气)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 2297.8
- 散金: 20
- 帖子: 89
- 在线: 72.2小时
- 虫号: 1318109
- 注册: 2011-06-08
- 性别: GG
- 专业: 基因表达调控与表观遗传学
9楼2014-09-18 17:09:22
lpzl
木虫 (正式写手)
- 应助: 59 (初中生)
- 金币: 4125.1
- 红花: 2
- 帖子: 306
- 在线: 526.2小时
- 虫号: 2412684
- 注册: 2013-04-11
- 性别: GG
- 专业: 生物化学
10楼2014-09-18 18:04:12
