24小时热门版块排行榜    

查看: 3459  |  回复: 23
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

ufoloveshe

铜虫 (小有名气)

[求助] 镍柱纯化蛋白,遇到史上最顽固的杂蛋白 已有6人参与

做了很久的镍离子亲和层析纯化蛋白,遇到了史上最顽固的杂蛋白,怎么除都除不掉。而且浓缩后观察,貌似还有增多的趋势,实在令人费解。咪唑浓度设计梯度,增加到50mM时候就有目的蛋白析出,因此洗杂缓冲液一直设定在25mM,但杂蛋白貌似和镍柱结合的很紧密,洗杂缓冲液洗不下来,最后都和目的蛋白一同下来了。请大神指教。

镍柱纯化蛋白,遇到史上最顽固的杂蛋白
CYD浓缩后:M,原,浓缩管水洗液,缓,缓洗,25,25水洗,100,100水洗,胍2 (1).jpg


镍柱纯化蛋白,遇到史上最顽固的杂蛋白-1
TPK浓缩后:M,胍前,缓,25,100,胍2,M,CYD25,CYD-EDTA,CYD溜总 (1).jpg
回复此楼
抱怨是你应有的惩罚
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ufoloveshe

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
11楼: Originally posted by kuenyunliu at 2014-09-18 21:44:58
一个镍柱能解决所有蛋白的问题那其他产品还用来干嘛
如果一定要拿到非常纯的蛋白样品的话,尝试多个柱子联用吧

老板非说需要蛋白浓度达到百分之九十以上才让过分子筛,比较郁闷啊
抱怨是你应有的惩罚
16楼2014-09-19 09:04:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 24 个回答

lpzl

木虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
楼主解决了么??
Start_everyday_with_a_new_hope,_leave_bad_memories...
2楼2014-09-17 09:14:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

忘记将来

木虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
那你用40mM或者45mM洗呀,
4楼2014-09-17 13:03:06
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

树在田野

金虫 (小有名气)

50洗啊

[ 发自小木虫客户端 ]
好好学习
5楼2014-09-17 13:35:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[博后之家] 售SCI文章,我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +3 k0dTPqJtl0jt 2026-08-14 3/150 2026-08-15 12:41 by KxMI1BYBxWX1
[考博] 售一区SCI文章T0P,我:8O.551.O54,科目全,可十急 +3 k0dTPqJtl0jt 2026-08-14 3/150 2026-08-15 12:33 by KxMI1BYBxWX1
[基金申请] 欢迎发来filecode的Mz6后的代码验证其规律 +25 医学老男孩 2026-08-13 52/2600 2026-08-15 11:49 by 大快人心啦
[考研] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +5 HFw0lei2R37i 2026-08-14 9/450 2026-08-15 11:33 by KxMI1BYBxWX1
[基金申请] 哪位老哥知道今年的国自然具体哪一天放榜? +6 Ldrop2023 2026-08-13 6/300 2026-08-15 10:09 by tuanggou
[公派出国] 售SCI-T0P文章,我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 k0dTPqJtl0jt 2026-08-14 5/250 2026-08-15 07:09 by 4wMiSEwB6436
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章,我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +3 HFw0lei2R37i 2026-08-14 4/200 2026-08-15 04:17 by 4wMiSEwB6436
[找工作] 售SCI文章,我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 k0dTPqJtl0jt 2026-08-14 4/200 2026-08-15 02:21 by 4wMiSEwB6436
[考研] 售SCI一区T0P文章,我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +3 HFw0lei2R37i 2026-08-14 7/350 2026-08-15 00:40 by 4wMiSEwB6436
[基金申请] 是这周出结果还是下周出结果? +4 yuleib84 2026-08-11 4/200 2026-08-14 23:05 by lfy8008
[教师之家] 售SCI一区文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +3 HFw0lei2R37i 2026-08-14 5/250 2026-08-14 22:32 by 4wMiSEwB6436
[基金申请] 奇怪,两个人的filecode固定段从头到尾一模一样 +8 布布和一二 2026-08-10 11/550 2026-08-14 14:58 by Equinoxhua
[基金申请] filecode +15 documentary 2026-08-10 17/850 2026-08-14 10:08 by kissu88
[硕博家园] 一作与独作在应聘高校教师时区别大吗 +3 mbygzh 2026-08-08 4/200 2026-08-13 19:31 by 龙-樱
[基金申请] 静等基金结果 +8 gjjjzhong 2026-08-10 21/1050 2026-08-13 17:56 by 且听虎啸
[基金申请] 重要来源:本周末出结果 +10 瞬息宇宙 2026-08-12 10/500 2026-08-13 15:46 by likettle
[基金申请] Filecode 又变了,巨变 +3 WH3796 2026-08-12 4/200 2026-08-13 14:13 by 小木虫6752397
[基金申请] 什么时候出结果,有咨询渠道??? +3 Tide man 2026-08-11 3/150 2026-08-11 17:54 by kudofaye
[基金申请] 2026国自然放榜时间 +9 布布和一二 2026-08-08 9/450 2026-08-10 11:22 by xxxx2020
[基金申请] 关于filecode,很负责任的告诉大家 +6 爱看书的可乐 2026-08-08 7/350 2026-08-08 22:13 by a_niu
信息提示
请填处理意见