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这样的引物能做荧光定量PCR吗？ 已有3人参与
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图为荧光定量引物的验证。从左到右依次为Marker DL5000、引物1、引物2、内参GAPDH。虽说目的条带跑出来了，但最下方引物二聚体也很明显，包括内参也存在引物二聚体，三对引物PCR反应的退火温度分别为53℃、55℃、57℃，后来又试着把三对的退火温度统一设为60℃，依旧出现引物二聚体。这种情况下引物还能用做荧光定量PCR吗？ 引物具体信息如下：（1-F %GC为40%，TM值为53.7；1-R %GC为40%，TM值为53.7）；（2-F %GC为45%，TM值为55.8；2-R %GC为40%，TM值为53.7）；（GAPDH-F %GC为61.1%，TM值为59.6；GAPDH-R %GC为50%，TM值为57.8.）  20140912.jpg |
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