| 查看: 2182 | 回复: 9 | |||
[求助]
这样的引物能做荧光定量PCR吗？ 已有3人参与
|
|
图为荧光定量引物的验证。从左到右依次为Marker DL5000、引物1、引物2、内参GAPDH。虽说目的条带跑出来了，但最下方引物二聚体也很明显，包括内参也存在引物二聚体，三对引物PCR反应的退火温度分别为53℃、55℃、57℃，后来又试着把三对的退火温度统一设为60℃，依旧出现引物二聚体。这种情况下引物还能用做荧光定量PCR吗？ 引物具体信息如下：（1-F %GC为40%，TM值为53.7；1-R %GC为40%，TM值为53.7）；（2-F %GC为45%，TM值为55.8；2-R %GC为40%，TM值为53.7）；（GAPDH-F %GC为61.1%，TM值为59.6；GAPDH-R %GC为50%，TM值为57.8.）  20140912.jpg |
回复此楼» 猜你喜欢
不合理蛙科研实验中的趣事：实验器材的 “乌龙”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验中的趣事：和实验材料的 “斗智斗勇”
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有113人回复
-
蛋白质检测：精准分析，解锁生物分子的密码
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之小鼠实验：严谨设计，解析生命机制的重要载体
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之重金属检测：精准筛查，守护健康与环境的防线
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“蛙测重金属我背锅三千”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“鼠逃三次我发三篇SCI”
已经有0人回复
-
纳米粒度分析
已经有3人回复
-
林科院林化所招收材料与化工专业硕士，坐标南京
已经有0人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 设计荧光定量PCR引物
已经有8人回复
- 请帮忙设计荧光定量PCR引物
已经有7人回复
- 你们的荧光定量检测引物扩增的标准曲线问题！求指教
已经有4人回复
- 荧光定量PCR引物设计
已经有8人回复
- microRNA的荧光定量PCR
已经有4人回复
- 关于荧光定量PCR引物设计的问题
已经有7人回复
- 新人做qRT-PCR 引物怎么设计？
已经有5人回复
- 定量PCR-引物二聚体问题
已经有5人回复
- 使用多对引物进行实时定量PCR后未得到实验结果，是否能说明目的基因不表达？
已经有10人回复
- 关于实时荧光定量引物设计
已经有5人回复
- SYBR荧光定量的溶解曲线
已经有10人回复
- 大家做RT-qPCR设计引物用的什么软件呀？
已经有15人回复
- PCR的正向引物和反向引物可以一起存放吗?
已经有19人回复
- 能不能只用一条引物做不对称PCR？
已经有11人回复
- PCR的引物扩增后会被降解掉吗？
已经有10人回复
- 定量引物扩增特异性检测
已经有1人回复
- 两种引物的PCR电泳图，做了多次还是不解
已经有18人回复
- PCR最短可以P多少bp，求大家帮我设计引物！
已经有7人回复
- 做RT-PCR的战友们，内标定量怎么做？
已经有18人回复
- 实时定量PCR 数据处理
已经有7人回复
- 【求助/交流】实时定量pcr引物设计问题？是否一定要跨内含子！
已经有3人回复
- 【求助/交流】荧光定量PCR与半定量的RT－PCR在设计引物时有什么区别？
已经有8人回复
- 【求助/交流】做实时定量PCR需要校正内参吗？
已经有9人回复
- 【求助/交流】为什么PCR引物不能反复冻融？后果会是怎样
已经有20人回复
- 【求助/交流】荧光定量PCR引物跨内含子的问题
已经有9人回复
wangranjun
荣誉版主 (知名作家)
广庭之惘然
-
专家经验: +106 - 应助: 108 (高中生)
- 贵宾: 2.351
- 金币: 33457.9
- 散金: 3850
- 红花: 153
- 沙发: 8
- 帖子: 5316
- 在线: 1310.2小时
- 虫号: 2234819
- 注册: 2013-01-11
- 性别: GG
- 专业: 药物毒理
- 管辖: 文学芳草园
2楼2014-09-14 18:31:04
dxh86412
铜虫 (初入文坛)
- 应助: 13 (小学生)
- 金币: 180.8
- 帖子: 49
- 在线: 42.5小时
- 虫号: 2003142
- 注册: 2012-09-15
- 性别: GG
- 专业: 临床兽医学
3楼2014-09-15 00:24:15
4楼2014-09-15 08:42:55
jurkat.1640
至尊木虫 (文坛精英)
- MolEPI: 1
- 应助: 908 (博后)
- 金币: 17168.2
- 散金: 1654
- 红花: 121
- 沙发: 41
- 帖子: 14522
- 在线: 2184.3小时
- 虫号: 514340
- 注册: 2008-02-28
- 性别: GG
- 专业: 病毒学
5楼2014-09-15 12:39:20
6楼2014-09-15 17:04:48
running113
木虫 (著名写手)
- 应助: 23 (小学生)
- 金币: 4213.9
- 散金: 67
- 红花: 1
- 帖子: 1217
- 在线: 267.4小时
- 虫号: 1777690
- 注册: 2012-04-25
- 性别: GG
- 专业: 医学心理学
7楼2014-09-15 17:35:04
jurkat.1640
至尊木虫 (文坛精英)
- MolEPI: 1
- 应助: 908 (博后)
- 金币: 17168.2
- 散金: 1654
- 红花: 121
- 沙发: 41
- 帖子: 14522
- 在线: 2184.3小时
- 虫号: 514340
- 注册: 2008-02-28
- 性别: GG
- 专业: 病毒学
8楼2014-09-16 08:52:43
zhangyunjing
金虫 (小有名气)
- 应助: 72 (初中生)
- 金币: 1513.9
- 红花: 7
- 帖子: 202
- 在线: 164.5小时
- 虫号: 1952690
- 注册: 2012-08-23
- 性别: MM
- 专业: 理论法学
赵晓楠zxn9楼2014-09-17 08:44:51
10楼2014-09-20 18:33:31
5