| 查看: 2145 | 回复: 18 | ||
| 本帖产生 1 个 BioEPI ，点击这里进行查看 | ||
muchong5577金虫 (正式写手)
|
[求助]
做RT-PCR的战友们，内标定量怎么做？
|
|
| 从来没做过内标定量的荧光定量PCR，有战友做过这个没？内标定量有什么优点？具体怎么做？初次接触，望大家帮我解答这些疑问。告诉我这方面的文献资料也行。谢谢了！ |
回复此楼» 猜你喜欢
311求调剂
已经有4人回复
-
304求调剂
已经有4人回复
-
354求调剂
已经有7人回复
-
321求调剂
已经有3人回复
-
274求调剂
已经有5人回复
-
281求调剂（0805）
已经有15人回复
-
085600材料与化工调剂 324分
已经有8人回复
-
能源材料化学课题组招收硕士研究生8-10名
已经有10人回复
-
267一志愿南京工业大学0817化工求调剂
已经有8人回复
-
328求调剂，英语六级551，有科研经历
已经有10人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- RNA浓度好低 适合做RT-PCR吗？
已经有7人回复
- 这样的RNA电泳图，能不能做RT-PCR
已经有9人回复
- 【求助/交流】荧光定量PCR与半定量的RT－PCR在设计引物时有什么区别？
已经有8人回复
- 【求助/交流】做培养细胞的RT-PCR，β-actin内参出现两个条带，求原因。
已经有10人回复
- 【求助/交流】关于做荧光定量pcr的模板问题
已经有12人回复
- 【原创】实时定量PCR 内标选择参考
已经有8人回复
- 【求助】关于内标法定量和如何添加回收率指示物
已经有12人回复
- 谁做过双链RNA的RT-PCR
已经有4人回复
muchong5577
金虫 (正式写手)
- BioEPI: 1
- 应助: 6 (幼儿园)
- 金币: 929.2
- 散金: 67
- 红花: 3
- 帖子: 675
- 在线: 136.6小时
- 虫号: 703384
- 注册: 2009-02-18
- 性别: GG
- 专业: 生物化学
期待高手的帮助 2楼2011-08-09 16:09:59
adslye
银虫 (正式写手)
- BioEPI: 10
- 应助: 6 (幼儿园)
- 贵宾: 0.244
- 金币: 364.9
- 散金: 766
- 红花: 6
- 帖子: 514
- 在线: 119.5小时
- 虫号: 845336
- 注册: 2009-09-11
- 性别: GG
- 专业: 流行病学方法与卫生统计
【答案】应助回帖
★ ★ ★ ★ ★
muchong5577(金币+5): 非常感谢！ 2011-08-10 09:42:41
lstt09nk(金币+5, BioEPI+1): 我也要做这个，感谢分享~~ 2011-08-11 13:06:15
muchong5577(金币+5): 非常感谢！ 2011-08-10 09:42:41
lstt09nk(金币+5, BioEPI+1): 我也要做这个，感谢分享~~ 2011-08-11 13:06:15
|
1.内标定量？是指的内参吧？reference gene ？是这个吗？ 2.real-time 定量有三种：标准曲线法，双标准曲线法，DELTA DELTA CT法。（PS.没有楼主说的内标定量法） 标准曲线法：是精确定量，知道具体的表达数，一般应用于医院检测病毒携带数（乙肝病毒数）。 后面两者是相对定量，知道A和B之间的关系，比如：A是B的多少倍。用于处理组和非处理组之间的基因表达差异。 一般认为绝对定量可以不用内参，相对定量使用内参。 3.具体操作过程。个人感觉楼主初次接触，还是看些资料吧。 生物秀这个栏目还可以http://ask.bbioo.com/special/experiment/RealtimePCR.htm 推荐这本书《Real-time PCR》 网上有下，我就不上传了。 |
3楼2011-08-09 16:39:41
4楼2011-08-09 22:57:43
muchong5577
金虫 (正式写手)
- BioEPI: 1
- 应助: 6 (幼儿园)
- 金币: 929.2
- 散金: 67
- 红花: 3
- 帖子: 675
- 在线: 136.6小时
- 虫号: 703384
- 注册: 2009-02-18
- 性别: GG
- 专业: 生物化学
5楼2011-08-10 09:47:30
adslye
银虫 (正式写手)
- BioEPI: 10
- 应助: 6 (幼儿园)
- 贵宾: 0.244
- 金币: 364.9
- 散金: 766
- 红花: 6
- 帖子: 514
- 在线: 119.5小时
- 虫号: 845336
- 注册: 2009-09-11
- 性别: GG
- 专业: 流行病学方法与卫生统计
【答案】应助回帖
muchong5577(金币+2): 2011-08-12 08:44:43
|
1.您的实验目的是什么？是绝对定量还是相对定量？ 2.我说的内参是基因，是引物。感觉您的内标是模板。我理解的对吗？ 3.如果您要做绝对定量，绝对定量中已知浓度的样本是什么都可以，只要干净，浓度准确即可。 |
» 本帖已获得的红花（最新10朵）
muchong55776楼2011-08-10 10:18:37
muchong5577
金虫 (正式写手)
- BioEPI: 1
- 应助: 6 (幼儿园)
- 金币: 929.2
- 散金: 67
- 红花: 3
- 帖子: 675
- 在线: 136.6小时
- 虫号: 703384
- 注册: 2009-02-18
- 性别: GG
- 专业: 生物化学
7楼2011-08-10 10:49:36
silicare
荣誉版主 (文坛精英)
合伙创业版兼职版主
- BioEPI: 14
- 应助: 88 (初中生)
- 贵宾: 29.823
- 金币: 18946.3
- 散金: 24272
- 红花: 300
- 沙发: 88
- 帖子: 10222
- 在线: 1602.6小时
- 虫号: 948825
- 注册: 2010-01-26
- 专业: 摩尼教
- 管辖: 新药研发
8楼2011-08-10 11:56:37
adslye
银虫 (正式写手)
- BioEPI: 10
- 应助: 6 (幼儿园)
- 贵宾: 0.244
- 金币: 364.9
- 散金: 766
- 红花: 6
- 帖子: 514
- 在线: 119.5小时
- 虫号: 845336
- 注册: 2009-09-11
- 性别: GG
- 专业: 流行病学方法与卫生统计
9楼2011-08-10 14:04:13
adslye
银虫 (正式写手)
- BioEPI: 10
- 应助: 6 (幼儿园)
- 贵宾: 0.244
- 金币: 364.9
- 散金: 766
- 红花: 6
- 帖子: 514
- 在线: 119.5小时
- 虫号: 845336
- 注册: 2009-09-11
- 性别: GG
- 专业: 流行病学方法与卫生统计
10楼2011-08-10 14:05:31
