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lu12306

新虫 (初入文坛)

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[求助] 提RNA时应注意的问题已有4人参与

提RNA时所用的溶剂是加DEPC水后灭菌还是直接用DEPC处理水配溶剂不用灭菌？
我看的RNA提取过程有用氯仿：异戊醇和无水乙醇。那这两个试剂怎么处理？

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1楼 2014-09-08 20:47:44

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bwangel

银虫 (小有名气)

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【答案】应助回帖

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是加DEPC水后灭菌,不灭菌对人体有害，注意自己安全，
至于后面几个药，新手最好自己去网上下RNA提取步骤，仔细按步骤做，或者用试剂盒的说明书，靠论坛上的人回答的可能不全面的。会误导你的。

2楼2014-09-09 16:15:20

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wanqingming

银虫 (正式写手)

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【答案】应助回帖

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myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香，分子生物期待你更多精彩。 2014-09-09 19:42:25

还是直接用试剂盒把，严格按照步骤操作。RNA不好提。。

好好生活。拿得起，放得下，要坚强。。。

3楼2014-09-09 17:09:39

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eulota

金虫 (著名写手)

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专业: 植物遗传学

【答案】应助回帖

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1. 加DEPC后灭菌；
2.异戊醇和乙醇可以直接使用，但是要专用，比如只用于RNA提取，防止污染。

4楼2014-09-11 08:15:09

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新虫 (初入文坛)

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【答案】应助回帖

加DEPC水后灭菌，DEPC可抑制RNA酶活性，高压灭菌可以除去残留的DEPC。
应该是异丙醇吧，异丙醇用来增加RNA沉淀,乙醇用来溶解有机物质，并且可以洗去残留的异丙醇，而且易挥发

5楼2014-09-23 21:34:09

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