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liweiwei0812

铜虫 (小有名气)

[交流] 细菌RNA提取问题 已有3人参与

用trizol试剂提取细菌总RNA,600bp以下有条带,23s和16s应该很大,是提取方法有问题吗?(平行实验的细胞RNA提取出来效果很好)还是trizol不适合提取细菌的RNA呢?
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李艳君2011

金虫 (小有名气)


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有图吗?用Trizol提取细菌的RNA没问题呀,是革兰氏阳性菌还是革兰氏阴性菌?提RNA需要跑Marker?
2楼2011-09-28 13:14:11
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liweiwei0812

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 李艳君2011 at 2011-09-28 13:14:11:
有图吗?用Trizol提取细菌的RNA没问题呀,是革兰氏阳性菌还是革兰氏阴性菌?提RNA需要跑Marker?

革兰氏阳性菌,找到原因了,前期没有用溶菌酶处理。。。用溶菌酶处理前要收集菌体还是直接把溶菌酶加到细菌培养液中,处理后再收集菌体呢?谢谢
3楼2011-09-30 11:26:06
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eileen8519

金虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
3楼: Originally posted by liweiwei0812 at 2011-09-30 11:26:06:
革兰氏阳性菌,找到原因了,前期没有用溶菌酶处理。。。用溶菌酶处理前要收集菌体还是直接把溶菌酶加到细菌培养液中,处理后再收集菌体呢?谢谢

应该是收集了菌体之后,再加入溶菌酶吧!
4楼2011-09-30 16:04:13
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juzi0627

铁虫 (初入文坛)

我收集菌体之后,加入溶菌酶 ,20mg/ml,处理10min。。还会没提取出来。。。我郁闷死了。
5楼2012-10-20 21:40:49
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juzi0627

铁虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
2032747楼: Originally posted by liweiwei0812 at 2011-09-30 11:26:06
革兰氏阳性菌,找到原因了,前期没有用溶菌酶处理。。。用溶菌酶处理前要收集菌体还是直接把溶菌酶加到细菌培养液中,处理后再收集菌体呢?谢谢...

这个溶菌酶,到底怎么处理,才合适呢?处理过之后,马上离心,家trizol。。可是,怎么还是不行呢、。。。指点下吧。
6楼2012-10-20 21:42:36
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juzi0627

铁虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
4715837楼: Originally posted by juzi0627 at 2012-10-20 21:42:36
这个溶菌酶,到底怎么处理,才合适呢?处理过之后,马上离心,家trizol。。可是,怎么还是不行呢、。。。指点下吧。...

我也是。溶菌酶混匀,静止。还是不行。
7楼2012-10-22 21:34:23
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