应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 细菌RNA的提取
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
81/1返回列表
查看: 1966  |  回复: 7
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

陈浩南-1987

铁虫 (正式写手)

[求助] 细菌RNA的提取

本人想用RT-PCR做细菌的基因表达，请问有没有做过细菌RNA提取的？
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2011-09-26 15:57:27
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yemuren

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
rainwander(金币+2): 鼓励交流 2011-09-26 17:48:06
首先你要注意要在细菌有转录你的目的基因最高峰的时候收集菌体，迅速冷冻，这样获得的RNA中你目的基因的丰度更高；至于RNA的提取，参照真菌的RNA提取方法就可以了一般用Trizol试剂提取，也有用试剂盒提取的，主要还是要注意所有用具都要去除RNase，使用新的有机溶剂异丙醇氯仿等，提取过程迅速就可以了。
赞一下(1人) 回复此楼
我的专长叫做流浪，所以我就做了流氓~
2楼2011-09-26 16:16:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhymhbu

木虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by yemuren at 2011-09-26 16:16:26:
首先你要注意要在细菌有转录你的目的基因最高峰的时候收集菌体，迅速冷冻，这样获得的RNA中你目的基因的丰度更高；至于RNA的提取，参照真菌的RNA提取方法就可以了一般用Trizol试剂提取，也有用试剂盒提取的，主要 ...

冷冻是指冰箱-20度，还是指液氮冷冻。保存多长时间可以

此外，楼主是做半定量PCR吗
赞一下 回复此楼
微生物学-发酵工程-生化工程-生化与分子生物学-环境毒理学
3楼2011-09-26 17:07:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yemuren

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
rainwander(金币+1): 鼓励交流 2011-09-27 10:38:27
引用回帖:
3楼: Originally posted by zhymhbu at 2011-09-26 17:07:20:
冷冻是指冰箱-20度，还是指液氮冷冻。保存多长时间可以

此外，楼主是做半定量PCR吗

液氮冷冻，最好是直接液氮研磨，如果没准备好其他的东西的话，先也氮冷冻，然后放到-80冰箱里。保存时间多久没试过，我一般都是直接提，最多的时候放了两天。
赞一下(1人) 回复此楼
我的专长叫做流浪，所以我就做了流氓~
4楼2011-09-26 19:41:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

陈浩南-1987

铁虫 (正式写手)
大家没有把握住要点，细菌是原核，跟真核的不一样，转录不一样，而且没有polyA尾巴，我就想问问这点如何解决
赞一下 回复此楼
5楼2011-09-27 21:40:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

雅yakee

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

怎么知道什么时候是我目的基因最高峰的时候呢？
赞一下(1人) 回复此楼
6楼2012-09-25 15:44:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ben1147

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
1929148楼: Originally posted by 陈浩南-1987 at 2011-09-27 21:40:16
大家没有把握住要点，细菌是原核，跟真核的不一样，转录不一样，而且没有polyA尾巴，我就想问问这点如何解决

这点很好解决啊，RT的时候用基因特异引物或者随机引物就行了么。又不是非得用oligo(dT)
赞一下 回复此楼
7楼2012-09-25 22:27:27
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

引用回帖:
1929148楼: Originally posted by 陈浩南-1987 at 2011-09-27 21:40:16
大家没有把握住要点，细菌是原核，跟真核的不一样，转录不一样，而且没有polyA尾巴，我就想问问这点如何解决

先提总RNA，反转录时不用oligo dT引物，可以用随机引物或者基因特异引物。如果你的目的基因的丰度不是很低的话，用随机引物比较好，这样合成的cDNA可以想做什么基因就做，方便比较。
赞一下 回复此楼
8楼2012-09-26 10:16:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 陈浩南-1987 的主题更新
81/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 0703调剂，一志愿天津大学319分 +18 haaaabcd 2026-04-05 19/950 2026-04-07 14:59 by 1104338198
[考研] 307求调剂 +3 Youth@@ 2026-04-07 3/150 2026-04-07 09:25 by 小黑不怕难
[考研] 0703化学调剂 348分 +8 唉我超真没招了 2026-04-06 8/400 2026-04-07 08:19 by houyaoxu
[考研] 复试调剂 +5 asdasdassda 2026-04-05 5/250 2026-04-06 09:32 by dongzh2009
[考研] 化学0703-一志愿211-338分求调剂 +8 vants 2026-04-05 8/400 2026-04-06 06:17 by houyaoxu
[考研] 285求调剂 +4 恶法大二的气味� 2026-04-05 5/250 2026-04-05 20:32 by 286640313
[考研] 考研调剂 +11 小sun要好运 2026-04-04 11/550 2026-04-05 08:02 by qlm5820
[考研] 专硕310求调剂 +5 捞捞我…. 2026-04-04 6/300 2026-04-04 23:33 by barlinike
[考研] 298求调剂 +5 zzz，，r 2026-04-02 8/400 2026-04-04 19:55 by 蓝云思雨
[考研] 292求调剂 +11 2022080213 2026-04-04 13/650 2026-04-04 18:38 by macy2011
[考研] 材料专硕322分 +13 哈哈哈吼吼吼哈 2026-04-01 13/650 2026-04-03 16:08 by 哦哦123
[考研] 一志愿复旦材料，英一专硕，总分357调剂 +4 1050389037 2026-04-02 5/250 2026-04-02 21:40 by dongzh2009
[考研] 372分材料与化工（085600）一志愿湖南大学求调剂 +5 蓝笺片 2026-04-02 6/300 2026-04-02 21:37 by dongzh2009
[考研] 279求调剂 +5 傅文秋 2026-04-02 5/250 2026-04-02 18:10 by 笔落锦州
[考研] 能源动力 调剂 +3 不破不立0 2026-04-02 3/150 2026-04-02 12:46 by ffffjjjj
[考研] 261求B区调剂 +5 明仔· 2026-04-01 7/350 2026-04-02 11:17 by 邹尉尉
[考研] 一志愿厦门大学化学工程（专硕）-数二英二406分-求调剂 +5 厦大化工 2026-04-01 5/250 2026-04-02 10:03 by jp9609
[考研] 266求调剂 +4 学员97LZgn 2026-04-02 4/200 2026-04-02 09:52 by yulian1987
[考研] 292求调剂 +17 木虫er12138 2026-04-01 17/850 2026-04-01 21:37 by 七度不信任
[考研] 一志愿北京科技大学085601材料工程英一数二初试总分335求调剂 +5 双马尾痞老板2 2026-03-31 5/250 2026-04-01 09:04 by oooqiao
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭