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陈浩南-1987

铁虫 (正式写手)

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[求助] 细菌RNA的提取

本人想用RT-PCR做细菌的基因表达，请问有没有做过细菌RNA提取的？

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1楼 2011-09-26 15:57:27

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yemuren

铁杆木虫 (正式写手)

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【答案】应助回帖

★ ★
rainwander(金币+2): 鼓励交流 2011-09-26 17:48:06

首先你要注意要在细菌有转录你的目的基因最高峰的时候收集菌体，迅速冷冻，这样获得的RNA中你目的基因的丰度更高；至于RNA的提取，参照真菌的RNA提取方法就可以了一般用Trizol试剂提取，也有用试剂盒提取的，主要还是要注意所有用具都要去除RNase，使用新的有机溶剂异丙醇氯仿等，提取过程迅速就可以了。

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我的专长叫做流浪，所以我就做了流氓~

2楼2011-09-26 16:16:26

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zhymhbu

木虫 (正式写手)

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引用回帖:

2楼: Originally posted by yemuren at 2011-09-26 16:16:26:
首先你要注意要在细菌有转录你的目的基因最高峰的时候收集菌体，迅速冷冻，这样获得的RNA中你目的基因的丰度更高；至于RNA的提取，参照真菌的RNA提取方法就可以了一般用Trizol试剂提取，也有用试剂盒提取的，主要 ...

冷冻是指冰箱-20度，还是指液氮冷冻。保存多长时间可以

此外，楼主是做半定量PCR吗

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微生物学-发酵工程-生化工程-生化与分子生物学-环境毒理学

3楼2011-09-26 17:07:20

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