应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 提取环境微生物的RNA，做微生物群落结构分析，请问要注意哪些问题啊？
91/1返回列表
查看: 1199  |  回复: 8
只看楼主@他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

shelly9018

新虫 (小有名气)

[交流] 提取环境微生物的RNA，做微生物群落结构分析，请问要注意哪些问题啊？已有5人参与

提取环境微生物的RNA，做微生物群落结构分析，请问要注意哪些问题啊？从样品保存，前处理，到提取，希望各位虫友帮帮忙，说得越详细越好！新手，希望能准备的全面点
回复此楼

» 收录本帖的淘帖专辑推荐

集萃园

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼2013-04-30 16:53:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

renzhiq

木虫 (小有名气)
★ ★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
laozuzunzhe: 金币+3, good！ 2013-05-01 22:11:20
首先是取样，取样有要快速的件样品保存，一般采用液氮速冻。所取样品如不能及时提取，至少应将样品保存于-80摄氏度冰箱。
前处理的话主要是杂质的去除，让你的样品中如固体悬浮颗粒降低，尽量增减样品中菌丝体的浓度
提取时需要做到菌体破壁完全，操作迅速，全程无RNA酶污染降解，最后用DNA酶充分消化后，尽快反转录，如果不能尽快反转录，保存于-80摄氏度冰箱
祝实验顺利
如有其它不明白，可以直接联系我373775310
赞一下(1人) 回复此楼
2楼2013-04-30 23:44:11
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

gaolijuan913

银虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
先自己查资料啊  你这就全部都指望别人不好吧？自己没老师么？
赞一下 回复此楼
nothing
3楼2013-05-01 08:46:23
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

shelly9018

新虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by gaolijuan913 at 2013-05-01 08:46:23
先自己查资料啊  你这就全部都指望别人不好吧？自己没老师么？

这个方面实验室没人做过，文献资料不可能把经验细节都告诉你！
赞一下 回复此楼
4楼2013-05-01 10:32:17
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

shelly9018

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by renzhiq at 2013-04-30 23:44:11
首先是取样，取样有要快速的件样品保存，一般采用液氮速冻。所取样品如不能及时提取，至少应将样品保存于-80摄氏度冰箱。
前处理的话主要是杂质的去除，让你的样品中如固体悬浮颗粒降低，尽量增减样品中菌丝体的浓 ...

要比较好的实验参考资料推荐下不！
赞一下 回复此楼
5楼2013-05-01 10:34:37
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

见神一笑

木虫 (著名写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
做微生物群落结构分析要提RNA？你用哪个基因的RNA来分析啊？
赞一下 回复此楼
好好努力
6楼2013-05-02 08:21:57
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

shelly9018

新虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by 见神一笑 at 2013-05-02 08:21:57
做微生物群落结构分析要提RNA？你用哪个基因的RNA来分析啊？

16sRNA，一般是用DNA的，但是我要做活性群落分析
赞一下 回复此楼
7楼2013-05-02 08:47:51
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

eagles123

金虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
sigma 有一种RNase Zap 买一瓶 到处喷喷 效果很好哟  还有你是用kit提 还是还是啥？ 用kit简单得多
赞一下 回复此楼
8楼2013-05-02 09:40:49
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

tjhyf2012

木虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
2楼: Originally posted by renzhiq at 2013-04-30 23:44:11
首先是取样，取样有要快速的件样品保存，一般采用液氮速冻。所取样品如不能及时提取，至少应将样品保存于-80摄氏度冰箱。
前处理的话主要是杂质的去除，让你的样品中如固体悬浮颗粒降低，尽量增减样品中菌丝体的浓 ...

请教一下，我目前在提取生物浸矿里面的RNA，每次得到的样品浓度都非常低，大概40ng/ul左右，电泳都看不到条带，按照您的说法，是否因为矿石颗粒存在于体系中，会造成RNA的大量损失？谢谢！
赞一下 回复此楼
9楼2014-01-03 21:41:52
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 shelly9018 的主题更新
91/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复(可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[硕博家园] 许下一个心愿 +3 山雨亦奇 2025-01-08 3/150 2025-01-08 23:44 by 飘过的晚辈
[材料综合] 超声仪器发热怎么办 50+4 毕生所学 2025-01-06 12/600 2025-01-08 22:44 by 户名已存在
[教师之家] 我们组一个学生一直不明白研究生和本科生的区别 +18 苏东坡二世 2025-01-03 18/900 2025-01-08 22:03 by jjsfb
[考博] 985本硕 正极材料 电化学方向 求博导收留 +4 海岸95 2025-01-05 6/300 2025-01-08 17:49 by 这是夏天呀
[论文投稿] 个人如何查询完整中科院分区表？ +3 XMCMENGLI 2025-01-08 5/250 2025-01-08 12:33 by chiangscn
[有机交流] 合成求助 20+4 Himass 2025-01-06 8/400 2025-01-08 11:00 by Himass
[考博] 25应届生申博~环境院或者化工院 +5 九天揽月? 2025-01-04 5/250 2025-01-08 10:58 by 老王146279
[基金申请] 网传，基金委面上项目评审专家名单打听费7万，获批后再提10% +16 babu2015 2025-01-02 18/900 2025-01-08 10:56 by GreenTrail
[论文投稿] Nature Communications期刊2024年版面费总收入超过5亿，近1/3为国人贡献 +10 chiangscn 2025-01-05 10/500 2025-01-08 10:21 by newfuzzy1
[教师之家] 高校老师很难相处的一个原因是都是高智商，并且高度理性 +11 akslis2024 2025-01-05 12/600 2025-01-07 16:46 by 六两废铜
[公派出国] 意大利米兰理工大学Anjam Khursheed 教授招收CSC博士 +3 虚拟语气？ 2025-01-05 3/150 2025-01-07 16:46 by 奶凶典韦
[教师之家] 咨询一下，寒假写本子过好年的概率大不大 +5 akslis2024 2025-01-05 7/350 2025-01-07 08:57 by Quakerbird
[基金申请] 川大课题组发science标注个人资金支持，无国家项目资助 +14 babu2015 2025-01-04 18/900 2025-01-06 19:53 by RRRKKK
[教师之家] 终于还是决定今年申报项目 +12 原因在哪里 2025-01-02 16/800 2025-01-06 16:22 by 啄木鸟、
[论文投稿] 论文进入proof阶段，说按照special issue处理，选择不同意，会被拒吗？ 500+3 zhangxi0816 2025-01-03 14/700 2025-01-06 11:09 by 多听多看多学
[论文投稿] OSA论文投稿求助 5+3 19831613600 2025-01-04 6/300 2025-01-06 08:07 by 19831613600
[教师之家] 论文辅导咨询 +3 zzz-yy 2025-01-05 5/250 2025-01-05 17:17 by 走了002
[教师之家] 人才帽子和职称是不是一种激励手段 +4 akslis2024 2025-01-04 4/200 2025-01-05 09:53 by 走了002
[论文投稿] 机床与液压投稿 1+3 buchumen 2025-01-03 3/150 2025-01-04 10:26 by nono2009
[考博] 专家推荐信 +4 ℡额尔古纳 2025-01-02 5/250 2025-01-03 08:09 by ℡额尔古纳
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭