24小时热门版块排行榜    

查看: 2850  |  回复: 7

20111987

金虫 (正式写手)

[求助] 秀丽隐杆线虫RNA提取中遇到的问题

我刚做完线虫的RNA提取,结果非常不好,由于是初次接触分子方面的试验,不知道RNA提取过程中都应该注意什么问题,应该如何避免。另外想请教大家有关线虫基因内参片段大小为多少?akt-2,hsp-16.2,hsp-70,tub-1,sod-3,daf-16,skn-1的分子片段各为多少,急求帮忙啊!
另外附上我跑完的电泳结果,这是用不同引物反转录后得到的结果,不知道最前边的条带是什么啊?

PCR结果
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jhu132llh

荣誉版主 (知名作家)

大洪

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
20111987: 金币+5, ★★★很有帮助 2012-05-26 08:03:04
RNA抽提主要是放降解
最后测一下OD值1.8左右就行了
这个具体的结果可能你去分子生物学版求助会更好

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

青春的岁月,我们身不由己,只因这胸中燃烧的梦想!
2楼2012-05-25 20:57:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

20111987

金虫 (正式写手)

送鲜花一朵
引用回帖:
2楼: Originally posted by jhu132llh at 2012-05-25 20:57:55
RNA抽提主要是放降解
最后测一下OD值1.8左右就行了
这个具体的结果可能你去分子生物学版求助会更好

谢谢您的帮助!
3楼2012-05-26 08:02:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

20111987

金虫 (正式写手)

送鲜花一朵
引用回帖:
2楼: Originally posted by jhu132llh at 2012-05-25 20:57:55
RNA抽提主要是放降解
最后测一下OD值1.8左右就行了
这个具体的结果可能你去分子生物学版求助会更好

谢谢您的帮助!
4楼2012-05-26 08:02:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

elric

新虫 (著名写手)

直接用RNA试剂盒提的,另外akt-2,hsp-16.2,hsp-70,tub-1,sod-3,daf-16,skn-1的分子片段在wormbase上可查啊
5楼2012-12-02 03:54:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

20111987

金虫 (正式写手)

引用回帖:
5楼: Originally posted by elric at 2012-12-02 03:54:31
直接用RNA试剂盒提的,另外akt-2,hsp-16.2,hsp-70,tub-1,sod-3,daf-16,skn-1的分子片段在wormbase上可查啊

谢谢您的回复,可以说的再具体点吗?我后来是在别的网站上查到了,但是有的引物还是查不出片段大小,如果能按照楼主教的方法确认一下最好咯
6楼2012-12-03 20:19:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

糖粥

新虫 (初入文坛)

秀丽隐杆线虫提取RNA时,要选择成虫,避开产卵期。虫体要用M9洗干净,取30-40微升就可以了,加入1毫升的Trizol,用RNAfree的匀浆器在冰上研磨约3分钟,破碎虫体,接下来就是正常的RNA提取过程了,使用的枪头和EP管都要是RNAfree.提完RNA跑胶的时候用新配置的胶和电泳液,跑出来的条带很亮,很清晰的。你的RNA提取的亮度不行,太弱。
7楼2013-03-10 20:48:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

扣扣里

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
7楼: Originally posted by 糖粥 at 2013-03-10 20:48:23
秀丽隐杆线虫提取RNA时,要选择成虫,避开产卵期。虫体要用M9洗干净,取30-40微升就可以了,加入1毫升的Trizol,用RNAfree的匀浆器在冰上研磨约3分钟,破碎虫体,接下来就是正常的RNA提取过程了,使用的枪头和EP管都 ...

直接在匀浆器里研磨的话,trizol的味道不会很大吗?是不是需要在通风处里进行?
8楼2021-04-29 19:05:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 20111987 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] NSFC申报书里申请人简历中代表性论著还需要在申报书最后的附件里面再上传一遍吗 20+5 NSFC2026我来了 2026-03-10 14/700 2026-03-15 23:53 by 不负韶华的虎
[考研] 材料与化工一志愿南昌大学327求调剂推荐 +5 Ncdx123456 2026-03-13 6/300 2026-03-15 23:39 by lovewei0727
[文学芳草园] 伙伴们,祝我生日快乐吧 +15 myrtle 2026-03-10 24/1200 2026-03-15 21:16 by 苏州_逗号
[考研] 化学工程321分求调剂 +5 大米饭! 2026-03-15 5/250 2026-03-15 18:49 by a不易
[基金申请] 国自科面上基金字体 +4 iwuli 2026-03-12 5/250 2026-03-15 17:07 by 风云无泪
[考研] 265求调剂 +4 威化饼07 2026-03-12 4/200 2026-03-14 17:23 by userper
[考研] 0703化学求调剂 +5 很老实人 2026-03-09 5/250 2026-03-14 02:57 by JourneyLucky
[考研] 332分材料工程调剂 +3 莓好时光海苔 2026-03-09 3/150 2026-03-14 02:03 by JourneyLucky
[考研] 333求调剂 +3 球球古力 2026-03-09 3/150 2026-03-14 01:57 by JourneyLucky
[考研] 328,0703考生求调剂,一志愿为东北师范大学 +4 观素律 2026-03-09 5/250 2026-03-14 01:24 by JourneyLucky
[考研] 一志愿湖师大化学289求调剂 +6 XMCMM3.14159 2026-03-10 6/300 2026-03-14 00:28 by JourneyLucky
[考研] 材料专硕288分求调剂 一志愿211 +4 在家想你 2026-03-11 4/200 2026-03-13 22:49 by JourneyLucky
[考研] 材料与化工085600调剂求老师收留 +9 jiaanl 2026-03-11 9/450 2026-03-13 20:22 by JourneyLucky
[考研] 一志愿211化学学硕310分求调剂 +8 努力奋斗112 2026-03-12 9/450 2026-03-13 15:41 by JourneyLucky
[考研] 314求调剂 +7 无懈可击的巨人 2026-03-12 7/350 2026-03-13 15:40 by JourneyLucky
[考研] 295求调剂 +3 小匕仔汁 2026-03-12 3/150 2026-03-13 15:17 by vgtyfty
[考研] 274求调剂 +3 S.H1 2026-03-12 3/150 2026-03-13 15:15 by JourneyLucky
[考研] 一志愿山大07化学 332分 四六级已过 本科山东双非 求调剂! +3 不想理你 2026-03-12 3/150 2026-03-13 14:18 by JourneyLucky
[考研] 0857环境调剂 +5 熠熠_11 2026-03-10 5/250 2026-03-11 10:59 by wang_dand
[考研] 大连大学化学专业研究生调剂 +3 琪久. 2026-03-10 8/400 2026-03-11 10:02 by 琪久.
信息提示
请填处理意见