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20111987

金虫 (正式写手)

[求助] 秀丽隐杆线虫RNA提取中遇到的问题

我刚做完线虫的RNA提取,结果非常不好,由于是初次接触分子方面的试验,不知道RNA提取过程中都应该注意什么问题,应该如何避免。另外想请教大家有关线虫基因内参片段大小为多少?akt-2,hsp-16.2,hsp-70,tub-1,sod-3,daf-16,skn-1的分子片段各为多少,急求帮忙啊!
另外附上我跑完的电泳结果,这是用不同引物反转录后得到的结果,不知道最前边的条带是什么啊?

PCR结果
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糖粥

新虫 (初入文坛)

秀丽隐杆线虫提取RNA时,要选择成虫,避开产卵期。虫体要用M9洗干净,取30-40微升就可以了,加入1毫升的Trizol,用RNAfree的匀浆器在冰上研磨约3分钟,破碎虫体,接下来就是正常的RNA提取过程了,使用的枪头和EP管都要是RNAfree.提完RNA跑胶的时候用新配置的胶和电泳液,跑出来的条带很亮,很清晰的。你的RNA提取的亮度不行,太弱。
7楼2013-03-10 20:48:23
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