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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 药理学 » 【求助】冰冻组织RNA提取相关问题
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bianyu

铜虫 (正式写手)

[交流] 【求助】冰冻组织RNA提取相关问题 已有4人参与

大家新年好！请教各位有关冰冻组织提取RNA的问题：
1.年前做了保肝的动物实验，肝组织液氮处理后放在-80度冰箱了，过完年了要提取RNA了，因为是第一次做，刚做了几个预实验，发现冰冻状态下组织太难取了！请教大家都是怎么取的？
2.有的组织上带有血（生理盐水洗过的，可能是没洗完全），会不会影响到组织RNA？
3.研钵研磨，组织固体很坚硬加液氮更加如此，很容易溅出，不知有没有什么好的方法？
谢谢大家！
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1楼 2011-02-21 09:06:36
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bianyu

铜虫 (正式写手)

有没有经验可以共享下？查了资料没有人提及这么具体的步骤！
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2楼2011-02-21 13:23:20
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zuier

3楼2011-02-21 17:15:47
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bianyu

铜虫 (正式写手)

既然没人响应自己响应下，查到资料与大家共享：
冰冻组织（最好在半年之内，-80℃或者液氮中冻存的），注意不要反复冻融，从冰冻状态拿到0-4℃，注意不要拿到常温，待组织解冻后，用 DEPC（应该是DEPC H2O）泡过的（泡多长时间，需不需要烘烤？）剪刀剪一小块组织，称重后，放到预冷的匀浆器中，然后加入一定量的TRIZOL试剂，然后匀浆。注意：速度不要太快，要匀一会停一会，否则由于摩擦产热，RNA遇热会加速降解。
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4楼2011-02-21 21:35:50
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Lynn和Mia

金虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
感谢楼主还来分享查到的资料！！！
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5楼2012-06-06 16:41:32
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梨蕾梅花

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
4楼: Originally posted by bianyu at 2011-02-21 21:35:50
既然没人响应自己响应下，查到资料与大家共享：
冰冻组织（最好在半年之内，-80℃或者液氮中冻存的），注意不要反复冻融，从冰冻状态拿到0-4℃，注意不要拿到常温，待组织解冻后，用 DEPC（应该是DEPC H2O）泡过的 ...

多谢楼主的分享，我也碰到这样的问题，但是我也是新手上路，过来学习的
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6楼2018-04-10 21:14:11
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