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bianyu

铜虫 (正式写手)

[交流] 【求助】冰冻组织RNA提取相关问题 已有4人参与

大家新年好!请教各位有关冰冻组织提取RNA的问题:
1.年前做了保肝的动物实验,肝组织液氮处理后放在-80度冰箱了,过完年了要提取RNA了,因为是第一次做,刚做了几个预实验,发现冰冻状态下组织太难取了!请教大家都是怎么取的?
2.有的组织上带有血(生理盐水洗过的,可能是没洗完全),会不会影响到组织RNA?
3.研钵研磨,组织固体很坚硬加液氮更加如此,很容易溅出,不知有没有什么好的方法?
谢谢大家!
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bianyu

铜虫 (正式写手)


有没有经验可以共享下?查了资料没有人提及这么具体的步骤!
2楼2011-02-21 13:23:20
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3楼2011-02-21 17:15:47
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bianyu

铜虫 (正式写手)


既然没人响应自己响应下,查到资料与大家共享:
冰冻组织(最好在半年之内,-80℃或者液氮中冻存的),注意不要反复冻融,从冰冻状态拿到0-4℃,注意不要拿到常温,待组织解冻后,用 DEPC(应该是DEPC H2O)泡过的(泡多长时间,需不需要烘烤?)剪刀剪一小块组织,称重后,放到预冷的匀浆器中,然后加入一定量的TRIZOL试剂,然后匀浆。注意:速度不要太快,要匀一会停一会,否则由于摩擦产热,RNA遇热会加速降解。
4楼2011-02-21 21:35:50
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Lynn和Mia

金虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
感谢楼主还来分享查到的资料!!!
5楼2012-06-06 16:41:32
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梨蕾梅花

新虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
4楼: Originally posted by bianyu at 2011-02-21 21:35:50
既然没人响应自己响应下,查到资料与大家共享:
冰冻组织(最好在半年之内,-80℃或者液氮中冻存的),注意不要反复冻融,从冰冻状态拿到0-4℃,注意不要拿到常温,待组织解冻后,用 DEPC(应该是DEPC H2O)泡过的 ...

多谢楼主的分享,我也碰到这样的问题,但是我也是新手上路,过来学习的
6楼2018-04-10 21:14:11
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