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qinchunhong

铁虫 (小有名气)

[求助] RNA提取中遇到的问题

1、DEPC水是不是要搅拌4个小时使其充分混匀后才能使用,用DEPC水浸泡枪头、EP管是不是要在盆里泡过夜还是直接在饭盒中浸泡过夜,第二天取出来尽量漏干水放在饭盒(也用DEPC水浸泡)中进行高压,需要浸泡镊子取拿枪头还是把枪头泡后拿出来放在枪头盒里面再进行高压呢?
2、采取组织放在-20度里面保存,未加入液氮,会影响RNA的提取吗?
3、加入氯仿后,我看有资料写的需要剧烈混匀,有写文献写的只要轻柔混匀,到底哪种方式更好?
4、如果我用常规电泳,1*TAE电泳液(用DEPC灭菌水配置)需要对电泳液进行灭菌吗?
请各位高手指点下,不甚感激!
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qwky2010

金虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

qinchunhong(金币+2, 博学EPI+1): 谢谢,今天提已经提出来了,呵呵 2011-08-05 21:44:09
只要全部浸入就可以了,无需搅拌,过夜放置后,取出来装好,再灭菌,
组织建议用新鲜的,有液氮更好,TAE无需灭菌,双氧水+NaOH处理电泳槽 具体百度之
天道酬勤
2楼2011-08-05 13:35:23
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