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20111987

金虫 (正式写手)

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虫号: 1242955
注册: 2011-03-23
性别: MM
专业: 实验动物学

[求助] 秀丽隐杆线虫RNA提取中遇到的问题

我刚做完线虫的RNA提取，结果非常不好，由于是初次接触分子方面的试验，不知道RNA提取过程中都应该注意什么问题，应该如何避免。另外想请教大家有关线虫基因内参片段大小为多少?akt-2,hsp-16.2,hsp-70,tub-1,sod-3,daf-16,skn-1的分子片段各为多少，急求帮忙啊！
另外附上我跑完的电泳结果，这是用不同引物反转录后得到的结果，不知道最前边的条带是什么啊？

PCR结果

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1楼 2012-05-24 18:04:57

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糖粥

新虫 (初入文坛)

应助: 0 (幼儿园)
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虫号: 2335260
注册: 2013-03-10
专业: 实验动物学

秀丽隐杆线虫提取RNA时，要选择成虫，避开产卵期。虫体要用M9洗干净，取30-40微升就可以了，加入1毫升的Trizol,用RNAfree的匀浆器在冰上研磨约3分钟，破碎虫体，接下来就是正常的RNA提取过程了，使用的枪头和EP管都要是RNAfree.提完RNA跑胶的时候用新配置的胶和电泳液，跑出来的条带很亮，很清晰的。你的RNA提取的亮度不行，太弱。