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铜虫 (小有名气)

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[交流] 提取植物RNA的实验过程需要注意哪些细节？已有3人参与

最近偶尔在题RNA，但用试剂盒提的质量总是不好，最近导师给买了RNA提取试剂，目前还没用不知道效果如何。大家都来讨论一下，提取RNA的过程中要注意哪些细节，才能让提取的RNA质量更好。

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1楼2012-11-23 23:13:57

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starseacow

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小丹木木: 金币+3, 鼓励交流经验 2012-11-24 13:45:33

1 避免RNA污染
2 有些植物材料含多酚多糖，影响提取，常规Trizol法提不出来，这就需要考虑使用幼嫩植物组织，添加2-巯基乙醇、二硫苏糖醇（DTT）或半胱氨酸防止酚氧化（但一般效果并不会太理想），添加pvp结合酚；对于多糖，可以通过LiCl沉淀RNA将部分多糖留在上清液中；此外，有些莫名其妙的此生代谢产物也会影响RNA提取，针对这个目前没有办法。有很多市售的试剂盒号称适用于植物RNA提取，但很多时候也未必好用。如果资金宽裕，可以多买几种试剂盒试试，否则从基本方法入手，如果遇到问题，再逐渐优化方法。