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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 提取植物RNA的实验过程需要注意哪些细节？
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12101008

铜虫 (小有名气)

[交流] 提取植物RNA的实验过程需要注意哪些细节？ 已有3人参与

最近偶尔在题RNA，但用试剂盒提的质量总是不好，最近导师给买了RNA提取试剂，目前还没用不知道效果如何。大家都来讨论一下，提取RNA的过程中要注意哪些细节，才能让提取的RNA质量更好。
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1楼 2012-11-23 23:13:57
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匿名

用户注销 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
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4楼2012-11-24 12:56:02
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starseacow

专家顾问 (职业作家)
★ ★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
小丹木木: 金币+3, 鼓励交流经验 2012-11-24 13:45:33
1 避免RNA污染
2 有些植物材料含多酚多糖，影响提取，常规Trizol法提不出来，这就需要考虑使用幼嫩植物组织，添加2-巯基乙醇、二硫苏糖醇（DTT）或半胱氨酸防止酚氧化（但一般效果并不会太理想），添加pvp结合酚；对于多糖，可以通过LiCl沉淀RNA将部分多糖留在上清液中；此外，有些莫名其妙的此生代谢产物也会影响RNA提取，针对这个目前没有办法。有很多市售的试剂盒号称适用于植物RNA提取，但很多时候也未必好用。如果资金宽裕，可以多买几种试剂盒试试，否则从基本方法入手，如果遇到问题，再逐渐优化方法。
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植物生理群69993869，为避免广告，申请加入请提供木虫昵称，院校及专业信息
2楼2012-11-24 00:42:57
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hch123

金虫 (正式写手)
★ ★ ★ ★
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小丹木木: 金币+3, 鼓励交流经验 2012-11-24 13:45:48
我觉得
1.实验器材和试剂要保证是无酶的。
2.研磨尽量湿磨，当然也没那么严格。
3.吸上清宁愿少吸点，以免吸到杂质，。
4.最后加水溶解前的晾干时间不要太长。
5.整个实验过程要勤换手套。
暂时就想到这么多，求高手补充！
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脚踏实地：遇一个，学一个，会一个。。。
3楼2012-11-24 11:59:08
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12101008

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 大-木-虫 at 2012-11-24 12:56:02
就是在研磨和转移的时候损失比较大，这里注意就行了，其他时候基本都是在化学试剂中存在的，不会降解太多，溶解的时候用好点的水，直接买生物公司处理好的就行了

上次我们老板带我提RNA，我看着研磨的过程确实跟我做的不太一样。
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5楼2012-11-24 19:32:48
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