24小时热门版块排行榜    

北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
查看: 2800  |  回复: 12
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

夏天的普洱茶

木虫 (著名写手)

[求助] 重组蛋白在BL21(DE3)中表达,存在包涵体 已有3人参与

我的酶在大肠杆菌中表达后,刚开始表达酶活很高,SDS-PAGE显示蛋白在上清液中,后来某一天酶活突然下降,降到原始酶活的1/3左右,重新转化筛选仍没有效果,SDS-PAGE显示上清中的蛋白量减少了,而破碎后的沉淀中存在很多,这应该是以包涵体的形式存在吧?每次的发酵条件都一样,为什么刚开始没有而后来出现了呢?有什么解决方法吗?希望各位虫友不吝赐教
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

夏天的普洱茶

木虫 (著名写手)

引用回帖:
8楼: Originally posted by liuxiuaza at 2014-11-28 14:34:45
想问一下,你接种的菌液是怎么来的?

甘油管里的
9楼2014-12-01 10:14:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 13 个回答

小小cool

金虫 (正式写手)

菌种退化了

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
2楼2014-09-05 20:54:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

夏天的普洱茶

木虫 (著名写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 小小cool at 2014-09-05 20:54:14
菌种退化了

可是重新转过筛选过啊
3楼2014-09-05 21:24:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

俗妮儿~

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
kx444555: 金币+2, 鼓励交流 2014-09-06 19:16:19
应该不是蛋白表达的问题,你确定每次发酵条件都一样?
看你的情况好像是蛋白产量太高,在菌体内大量积累就形成了包涵体。
干脆重新优化一下发酵条件吧,比如说温度时间什么的,再不行就试试分子伴侣质粒,这个东东有助于蛋白的折叠。
祝你实验顺利!
4楼2014-09-06 12:19:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 322求调剂 +8 宋明欣 2026-03-27 8/400 2026-03-30 13:38 by chemdavid
[考研] 考研调剂 +5 Sanmu-124 2026-03-26 5/250 2026-03-30 13:36 by chemdavid
[考研] 286分调剂 +7 Faune 2026-03-30 7/350 2026-03-30 13:26 by 帕尔马拉特
[考研] 材料工程专硕求调剂 +6 hyl3153942 2026-03-29 6/300 2026-03-30 12:04 by 1018329917
[考研] 0856求调剂 +8 楒桉 2026-03-28 8/400 2026-03-30 10:00 by wzy-lxz
[考研] 各位老师好,我的一志愿为北京科技大学085601材料专硕 +9 Koxui 2026-03-28 9/450 2026-03-29 20:43 by 无际的草原
[考研] 一志愿武汉理工,总分321,英一数二,求老师收留。 +11 nnnnnnn5 2026-03-25 11/550 2026-03-29 20:42 by 无际的草原
[考研] 一志愿南昌大学324求调剂 +5 hanamiko 2026-03-29 5/250 2026-03-29 16:46 by 学员8dgXkO
[考研] 0856求调剂 +13 zhn03 2026-03-25 14/700 2026-03-29 08:13 by fmesaito
[考研] 一志愿211 初试270分 求调剂 +8 谷雨上岸 2026-03-23 9/450 2026-03-29 01:00 by 我是小康
[考研] 311(085601)求调剂 +4 liziyeyeye 2026-03-28 4/200 2026-03-28 18:50 by 535743368
[考研] 材料与化工(0856)304求B区调剂 +8 邱gl 2026-03-27 8/400 2026-03-28 12:42 by 唐沐儿
[考研] 085405 考的11408求各位老师带走 +3 Qiu学ing 2026-03-28 3/150 2026-03-28 09:19 by 乐呵呵的追梦人
[考研] 复试调剂,一志愿南农083200食品科学与工程 +5 XQTJZ 2026-03-26 5/250 2026-03-27 14:49 by 狂炫麦当当
[考研] 08开头275求调剂 +4 拉谁不重要 2026-03-26 4/200 2026-03-27 14:12 by Delta2012
[考研] 一志愿吉大071010,316分求调剂 +3 xgbiknn 2026-03-27 3/150 2026-03-27 10:36 by guoweigw
[考研] 343求调剂 +4 赠我一本书 2026-03-23 4/200 2026-03-27 00:40 by wxiongid
[考研] 290分调剂求助 +3 吉祥止止陈 2026-03-25 3/150 2026-03-25 19:58 by barlinike
[考研] 一志愿吉林大学材料与化工303分求调剂 +4 为学666 2026-03-24 4/200 2026-03-25 11:27 by BruceLiu320
[考研] 277分求调剂,跨调材料 +3 考研调剂lxh 2026-03-24 3/150 2026-03-24 13:52 by JourneyLucky
信息提示
请填处理意见