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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 发酵/表达 » 蛋白成功表达，却没有活性，换个表达系统有必要吗？
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lijunzjut

铜虫 (小有名气)

[求助] 蛋白成功表达，却没有活性，换个表达系统有必要吗？ 已有2人参与

各位大虾，求助一个问题。
      从霉菌里克隆出一段酶的基因，经过稀有密码子修饰，成功表达在大肠（BL21）里, 经过sds-page检测发现在上清液里的确出现了清晰条带，说明我的蛋白可以可溶性表达，但是在检测酶的活性时，发现其活性极低（有，但可以忽略不计），请问，有没有必要尝试表达在酵母系统里再试试。蛋白在不同的系统里活性会有质的区别吗？毕竟我是真核表达在原核里。求大家支招。谢谢。
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1楼 2014-09-05 14:43:35
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冼亮淀粉酶

专家顾问 (知名作家)

生物大分子降解酶
编码序列确保正确吗？如果是以DNA为模板克隆出来再去除理论上的内含子，那毕竟还是不确切的。
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流星来时我许了个愿，愿我有吃有喝还有舒服的猪圈。讨厌发帖前不搜索论坛重复发帖和仅把论坛当解决问题工具，久不看论坛一来就提问者，宁弃EPI和VIP也不回帖。
5楼2014-09-06 01:48:26
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