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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】老婆实验表达的真核蛋白没有活性，无比郁闷，祈求建议和祝福
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lm_bob

金虫 (正式写手)

[交流] 【求助/交流】老婆实验表达的真核蛋白没有活性，无比郁闷，祈求建议和祝福 已有14人参与

辛辛苦苦表达的真核蛋白没有活性，无比郁闷，纯化后测定没有活性，有啥方法？重来？
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1楼 2010-09-14 08:38:26
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三妹妹

金虫 (小有名气)
★
lm_bob(金币+1):谢谢参与
没有活性有很多种可能的，也不一定就要从来的吧。同期待高人给予指点。
祝福楼主和楼主老婆，实验总会顺起来的：）
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2楼2010-09-14 08:46:20
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summer1121

铁杆木虫 (著名写手)
★
lm_bob(金币+1):谢谢参与
祝福顺利~~~~~
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~~做最好的自己~~
3楼2010-09-14 08:56:11
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mukondo

木虫 (正式写手)
★
lm_bob(金币+1):谢谢参与
顶一下，希望牛人为你解答
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4楼2010-09-14 08:57:06
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jianwei8730
★
lm_bob(金币+1):谢谢参与
祝福
5楼2010-09-14 09:00:30
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zl1270
★
lm_bob(金币+1):谢谢参与
祝福祝福！
6楼2010-09-14 09:04:16
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橙恋木

木虫 (著名写手)
★
lm_bob(金币+1):谢谢参与
祝福楼主lp好运早日到来！
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天天都是天蓝蓝
7楼2010-09-14 09:06:18
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dianaofyezi

金虫 (正式写手)
★ ★
lm_bob(金币+1):谢谢参与
lm_bob(金币+1): 2010-09-14 10:12:28
lstt09nk(金币+1):鼓励交流~ 2010-09-14 10:32:24
如二楼不一定要重来吧，至少要知道他为什么或者那个步骤的原因导致了他表达的没有活性吧。首先你是否用常规的方法检测器活性。第二你使用的什么方法表达蛋白呢？第三是否因为纯化处理不当导致失活了呢？
希望以上建议对你有用，GOOD LUCK！
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52187644
8楼2010-09-14 09:06:36
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kennyhas

铜虫 (小有名气)
★
lm_bob(金币+1):谢谢参与
lm_bob(金币+1):真核的 2010-09-14 10:12:45
她用的是什么表达系统？如果是用的原核表达系统表达真核蛋白是很可能没有活性的。真核蛋白通常都需要一些修饰，比如糖基化，才会具有活性。可以用真核的表达系统试试。
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9楼2010-09-14 09:23:07
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violet.zhou

木虫 (小有名气)
★
lm_bob(金币+1):谢谢参与
lm_bob(金币+1):还有其他原因吗 2010-09-14 10:13:06
这老实说可能性不是没有啊。还是要检查自己的实验步骤，有时候可能是培养基什么的问题，或者是真核表达之前的基因序列有没有问题什么的啊
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10楼2010-09-14 09:23:58
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