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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 发酵/表达 » 蛋白成功表达，却没有活性，换个表达系统有必要吗？
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lijunzjut

铜虫 (小有名气)

[求助] 蛋白成功表达，却没有活性，换个表达系统有必要吗？ 已有2人参与

各位大虾，求助一个问题。
      从霉菌里克隆出一段酶的基因，经过稀有密码子修饰，成功表达在大肠（BL21）里, 经过sds-page检测发现在上清液里的确出现了清晰条带，说明我的蛋白可以可溶性表达，但是在检测酶的活性时，发现其活性极低（有，但可以忽略不计），请问，有没有必要尝试表达在酵母系统里再试试。蛋白在不同的系统里活性会有质的区别吗？毕竟我是真核表达在原核里。求大家支招。谢谢。
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1楼 2014-09-05 14:43:35
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bio_sci

捐助贵宾 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
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lijunzjut: 金币+5, ★★★很有帮助 2014-09-06 10:27:47
必须换酵母，我做过一个丝状真菌的淀粉酶，大肠表达一点活性都没有，换到酵母系统，活性很高，绝对是这个原因

[ 发自小木虫客户端 ]
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3楼2014-09-05 20:49:11
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