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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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sunny_andy

金虫 (小有名气)

[求助] 求酶连方法的好文章或做过的PCR,酶切酶连的虫子的宝贵经验。 已有2人参与

如题,求酶连方法的好文章,或是您做PCR,酶切酶连经验丰富,有很多心得可以贡献给大家吗,有哪些比较快捷方便的基因PCR,酶切到酶连的好方法,100bp的片段几个月都酶连不上
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鬼羽帝魂

木虫 (著名写手)

说说你具体的问题和一些你拿不准的步骤,让大家给你分析一下
2楼2014-08-28 16:07:59
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我欲乘风归去

木虫 (正式写手)

实在不行放公司做去
3楼2014-08-29 09:51:28
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happydove

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
sunny_andy(西门吹雪170代发): 金币+3, 鼓励回帖交流 2014-08-29 20:49:37
100bp是很容易连的,你可以把的实验情况具体说一下,实验步骤和实验图片
1.载体酶切和基因酶切后质量可好?
2.连接的比例是否正确
3.是否连接转化过程中有阳性对照,阳性对照如何
4.不知道你的实验目的,你酶切连接,不能用TA克隆吗?
4楼2014-08-29 11:34:11
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zhangbighui

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
sunny_andy(西门吹雪170代发): 金币+2, 鼓励回帖交流 2014-08-29 20:49:47
100bp的应该很好连接的,你把你的基因序列分析结果还有载体信息介绍一下,基因GC含量过高不利于连接,还有就是酶切位点,有的酶有甲基化情况,如smaI,你把你实验操作说的具体点,这样好帮你分析一下
成功,就是成为你想成为的人
5楼2014-08-29 13:13:18
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