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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 求酶连方法的好文章或做过的PCR，酶切酶连的虫子的宝贵经验。
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sunny_andy

金虫 (小有名气)

[求助] 求酶连方法的好文章或做过的PCR，酶切酶连的虫子的宝贵经验。 已有2人参与

如题，求酶连方法的好文章，或是您做PCR，酶切酶连经验丰富，有很多心得可以贡献给大家吗，有哪些比较快捷方便的基因PCR，酶切到酶连的好方法，100bp的片段几个月都酶连不上
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1楼 2014-08-28 14:58:31
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鬼羽帝魂

木虫 (著名写手)
说说你具体的问题和一些你拿不准的步骤，让大家给你分析一下
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2楼2014-08-28 16:07:59
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我欲乘风归去

木虫 (正式写手)
实在不行放公司做去
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。
3楼2014-08-29 09:51:28
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happydove

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
sunny_andy(西门吹雪170代发): 金币+3, 鼓励回帖交流 2014-08-29 20:49:37
100bp是很容易连的，你可以把的实验情况具体说一下，实验步骤和实验图片
1.载体酶切和基因酶切后质量可好？
2.连接的比例是否正确
3.是否连接转化过程中有阳性对照，阳性对照如何
4.不知道你的实验目的，你酶切连接，不能用TA克隆吗？
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4楼2014-08-29 11:34:11
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zhangbighui

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
sunny_andy(西门吹雪170代发): 金币+2, 鼓励回帖交流 2014-08-29 20:49:47
100bp的应该很好连接的，你把你的基因序列分析结果还有载体信息介绍一下，基因GC含量过高不利于连接，还有就是酶切位点，有的酶有甲基化情况，如smaI，你把你实验操作说的具体点，这样好帮你分析一下
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成功，就是成为你想成为的人
5楼2014-08-29 13:13:18
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