应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 引物二聚体是否影响SSR后续实验
141/2返回列表12下一页
查看: 1744  |  回复: 13
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

Insecta_A

铜虫 (小有名气)

[求助] 引物二聚体是否影响SSR后续实验 已有4人参与

我的SSR-PCR跑出来的产物，有很明显的引物二聚体，有时比目的条带还要亮，请问SSR后续实验对引物二聚体要求严格吗？
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2014-08-26 22:16:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

Insecta_A

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by duanepp at 2014-08-27 10:20:24
上图最好，还有如果你ssr的片段不是很小的话就没有大的影响。不过最好还是摸索出最适条件

我的片段在100bp—200bp这个段，今天我通过touchdown pcr已经把引物二聚体的问题解决了，几乎看不到引物二聚体的带了
赞一下(1人) 回复此楼
6楼2014-08-27 14:00:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

bwangel

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
Insecta_A: 金币+2, ★有帮助 2014-08-27 08:21:19
给个图，看看程度，不过比目标重很多总不太好了，有加高点温度不
赞一下 回复此楼
2楼2014-08-26 23:13:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Insecta_A

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by bwangel at 2014-08-26 23:13:59
给个图，看看程度，不过比目标重很多总不太好了，有加高点温度不

我正准备做个Touchdown PCR试试，温度升高过，但是得率太低了，所以就又降了点哦
赞一下 回复此楼
3楼2014-08-27 08:22:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

duanepp

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
Insecta_A: 金币+1, ★有帮助 2014-08-27 14:00:44
上图最好，还有如果你ssr的片段不是很小的话就没有大的影响。不过最好还是摸索出最适条件
赞一下 回复此楼
4楼2014-08-27 10:20:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

biolinker

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
Insecta_A: 金币+1, ★有帮助 2014-08-27 14:00:52
同意楼上的说法，如果你的片段比较大的话，影响应该不大，引物二聚片段比较小，一般会跑在最前面。
赞一下 回复此楼
5楼2014-08-27 10:48:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

duanepp

木虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by Insecta_A at 2014-08-27 14:00:36
我的片段在100bp—200bp这个段，今天我通过touchdown pcr已经把引物二聚体的问题解决了，几乎看不到引物二聚体的带了...

二聚体多的话可以适当的减少引物的量，提高一下退火温度等操作减少。微卫星的pcr只要条件合适一般情况之下是很顺利的。你是做什么虫子的？
赞一下 回复此楼
7楼2014-08-31 09:10:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Insecta_A

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
7楼: Originally posted by duanepp at 2014-08-31 09:10:54
二聚体多的话可以适当的减少引物的量，提高一下退火温度等操作减少。微卫星的pcr只要条件合适一般情况之下是很顺利的。你是做什么虫子的？...

我做的是双重PCR，单独跑的时候引物二聚体较少，我一直在优化，还是除不掉，所以我就想如果不影响后面的毛细管电泳的话，我就不打算再优化这个了
赞一下 回复此楼
8楼2014-08-31 15:10:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

duanepp

木虫 (小有名气)
引用回帖:
8楼: Originally posted by Insecta_A at 2014-08-31 15:10:40
我做的是双重PCR，单独跑的时候引物二聚体较少，我一直在优化，还是除不掉，所以我就想如果不影响后面的毛细管电泳的话，我就不打算再优化这个了...

三条引物？M13?
回复此楼
9楼2014-09-01 09:27:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Insecta_A

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
9楼: Originally posted by duanepp at 2014-09-01 09:27:22
三条引物？M13?...

两对引物,SSR引物
赞一下 回复此楼
10楼2014-09-01 10:42:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 Insecta_A 的主题更新
141/2返回列表12下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 关于filecode，很负责任的告诉大家 +4 爱看书的可乐 2026-08-08 5/250 2026-08-08 19:06 by 超级海虾
[基金申请] 国基金的申报应该改成非等额制，评价高的钱多评价低的钱少，但是增加资助率 +7 a089 2026-08-07 7/350 2026-08-08 18:05 by gltch
[硕博家园] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +3 qTvzQBRAHjCi 2026-08-07 4/200 2026-08-08 17:19 by oEVWOejN9taj
[基金申请] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +3 Vi50GxzrFcSG 2026-08-07 5/250 2026-08-08 16:27 by oEVWOejN9taj
[考博] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +3 Vi50GxzrFcSG 2026-08-07 4/200 2026-08-08 16:22 by oEVWOejN9taj
[公派出国] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 Vi50GxzrFcSG 2026-08-07 5/250 2026-08-08 15:59 by oEVWOejN9taj
[论文投稿] 十年后又回来了，论文投稿求助 +5 哈哈114477 2026-08-01 5/250 2026-08-08 15:14 by 仁砚薪传
[论文投稿] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +3 Vi50GxzrFcSG 2026-08-07 6/300 2026-08-08 15:07 by oEVWOejN9taj
[博后之家] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +3 HEQlVqMTIA7d 2026-08-07 6/300 2026-08-08 14:42 by oEVWOejN9taj
[公派出国] 售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 HEQlVqMTIA7d 2026-08-07 6/300 2026-08-08 14:39 by oEVWOejN9taj
[教师之家] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +4 HEQlVqMTIA7d 2026-08-07 5/250 2026-08-08 14:27 by oEVWOejN9taj
[基金申请] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 KXLV3nuBVBY7 2026-08-07 5/250 2026-08-08 14:07 by oEVWOejN9taj
[基金申请] 关于代码变化问题，想知道的进来 +11 且听虎啸 2026-08-07 14/700 2026-08-08 12:50 by 布布和一二
[硕博家园] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 Vi50GxzrFcSG 2026-08-07 6/300 2026-08-08 10:19 by 3OOjAIS77qg2
[基金申请] 听说今天filecode变了 +24 布布和一二 2026-08-06 47/2350 2026-08-07 16:02 by zhiyanjiang
[基金申请] filecode与中标关系的预测 +3 布布和一二 2026-08-07 3/150 2026-08-07 15:09 by gltch
[基金申请] 大家散了吧，后缀研究没有意义，别浪费时间了，过好目前的每一天，不要焦虑 +5 Tide man 2026-08-06 7/350 2026-08-07 13:11 by 医学老男孩
[基金申请] 影响面上的因素 +8 布布和一二 2026-08-05 11/550 2026-08-06 10:41 by 宝贝虫子
[基金申请] 好消息？这个有何含义？？？ +8 Tide man 2026-08-05 10/500 2026-08-05 16:14 by xmuxiaoyu
[基金申请] 什么时候能放榜呀？ +3 Jacob678 2026-08-03 3/150 2026-08-03 16:14 by gltch
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭