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lksyb金虫 (正式写手)
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请问大家，大肠杆菌表达量突然变低是什么原因？已有2人参与
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| 我有一个真菌来源的重组蛋白，大肠杆菌表达的（pET28a /Rosetta）。大概一年前做的，最近要补点实验，但发现去年的菌种几乎无表达了.于是重新提质粒转化，但表达量还是很低，几乎纯化不到目的蛋白。我又重新PCR阔了基因，酶切连接转化，试了pET28a/pET30a/SUMO标签/GST标签，还试过截短表达。但目的蛋白均无表达。现在完全找不到原因，请问大家该如何解决这一问题啊？ |
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2楼2014-08-25 22:44:17
qxm2005
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3楼2014-08-26 09:32:23
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5楼2014-09-04 16:51:14
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- 专业: 病原微生物变异与耐药
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您好！我是江西南昌大学医学院的一名在读研究生，目前在构建原核表达载体，由于表达的目的基因含有较多的稀有密码子，前期在BL21(DE3)plysS中诱导不出。在论坛里看到您有Rosetta菌株，请问能否赠送一些给我，在本人论文及发表的文章中我会标出菌株来源。或者可以以我现有的质粒和菌株与您交换，我实验室现有pet28c，32a，pet41,DH5a,BL21,BL21(DE3),BL21(DE3)plysS。期待您的回复！谢谢！联系邮箱：gsxiang1990@sina.com 发自小木虫Android客户端 |
6楼2016-04-29 10:24:45
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本帖内容被屏蔽 |
7楼2021-03-08 22:15:17
