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lksyb

金虫 (正式写手)

[求助] 请问大家,大肠杆菌表达量突然变低是什么原因?已有2人参与

我有一个真菌来源的重组蛋白,大肠杆菌表达的(pET28a /Rosetta)。大概一年前做的,最近要补点实验,但发现去年的菌种几乎无表达了.于是重新提质粒转化,但表达量还是很低,几乎纯化不到目的蛋白。我又重新PCR阔了基因,酶切连接转化,试了pET28a/pET30a/SUMO标签/GST标签,还试过截短表达。但目的蛋白均无表达。现在完全找不到原因,请问大家该如何解决这一问题啊?
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夏天的普洱茶

木虫 (著名写手)

楼主你的问题解决了吗?我也遇到了类似的问题,不知道怎么解决
5楼2014-09-04 16:51:14
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