| 查看: 2154 | 回复: 6 | ||
| 【悬赏金币】回答本帖问题，作者lksyb将赠送您 20 个金币 | ||
lksyb金虫 (正式写手)
|
[求助]
请问大家，大肠杆菌表达量突然变低是什么原因？已有2人参与
|
|
| 我有一个真菌来源的重组蛋白，大肠杆菌表达的（pET28a /Rosetta）。大概一年前做的，最近要补点实验，但发现去年的菌种几乎无表达了.于是重新提质粒转化，但表达量还是很低，几乎纯化不到目的蛋白。我又重新PCR阔了基因，酶切连接转化，试了pET28a/pET30a/SUMO标签/GST标签，还试过截短表达。但目的蛋白均无表达。现在完全找不到原因，请问大家该如何解决这一问题啊？ |
回复此楼» 猜你喜欢
球磨纳米粒子条件
已经有6人回复
-
球磨分散剂
已经有4人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有189人回复
-
阴阳离子交换剂！！！！
已经有3人回复
-
二苄基磷酰氯，磷酸接酚羟基，
已经有11人回复
-
二苄基磷酰氯，磷酰氯
已经有10人回复
-
酸酐或者羧酸酰氯化
已经有15人回复
-
酚羟基接入磷酸，磷酸酯化
已经有26人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 大肠杆菌高密度表达问题
已经有5人回复
- 关于IPTG在人用药物蛋白大肠杆菌发酵表达中的应用问题
已经有2人回复
- 蛋白表达，大肠杆菌添加IPTG后菌液渐变澄清
已经有18人回复
- 请问在大肠杆菌中表达蛋白时会不会只表达一段目的蛋白？怎么解决呢？求高人指点
已经有12人回复
- 关于大肠杆菌表达目标蛋白问题
已经有21人回复
- 目的蛋白表达量低
已经有4人回复
- 毕赤酵母比大肠杆菌的优势何在？谁能给出较详细的答案？
已经有3人回复
- 大肠杆菌BL21表达包涵体的问题
已经有8人回复
- 大家说说大肠杆菌表达菌株一般最大能表达多少kd的蛋白质？
已经有12人回复
- 如何使大肠杆菌表达的时候不产生包涵体
已经有19人回复
- 各位做大肠杆菌发酵的朋友看过来，这到底是什么问题？
已经有18人回复
- 大肠杆菌表达蛋白毒性问题
已经有8人回复
- 求助：哪些类蛋白在大肠杆菌中不好表达？
已经有9人回复
- 为什么用大肠杆菌表达蛋白
已经有5人回复
- 我的蛋白在大肠杆菌中表达量低怎么办？
已经有7人回复
- 有人知道大肠杆菌中的外源蛋白最大表达量吗
已经有6人回复
- 目的基因合成在大肠杆菌里能表达么？
已经有3人回复
- 大肠杆菌转化后长的很慢或者不长
已经有10人回复
- 大肠杆菌表达42kd的蛋白，蛋白电泳显示只有35kd，测酶活还比较高，这是怎么回事儿呢？
已经有9人回复
- 大肠杆菌中RecA+是什么？主要是+号怎么理解？
已经有4人回复
- 大肠杆菌在摇瓶中休眠是怎么回事
已经有19人回复
- 请教大肠杆菌中蛋白表达后该如何处理
已经有7人回复
- 【求助/交流】线性化质粒能在大肠杆菌中表达吗
已经有7人回复
- 【求助/交流】大肠杆菌中蛋白表达量偏低，大家有什么建议？
已经有28人回复
- 【求助/交流】大肠杆菌表达问题
已经有19人回复
- 【求助/交流】关于大肠杆菌中蛋白表达的问题
已经有9人回复
- 重组后的大肠杆菌培养以后怎么变红了
已经有23人回复
2楼2014-08-25 22:44:17
qxm2005
木虫 (著名写手)
- 应助: 50 (小学生)
- 金币: 4027.3
- 散金: 145
- 红花: 14
- 帖子: 2357
- 在线: 2251.1小时
- 虫号: 1621098
- 注册: 2012-02-16
- 性别: GG
- 专业: 生物化工与食品化工
3楼2014-08-26 09:32:23
4楼2014-08-28 00:28:03
夏天的普洱茶
木虫 (著名写手)
- 应助: 69 (初中生)
- 金币: 5112.5
- 红花: 18
- 帖子: 1048
- 在线: 439.9小时
- 虫号: 1427657
- 注册: 2011-10-05
- 性别: MM
- 专业: 微生物生理与生物化学
5楼2014-09-04 16:51:14
Bioexperixgs
新虫 (正式写手)
- 应助: 13 (小学生)
- 金币: 672.9
- 散金: 337
- 红花: 8
- 帖子: 330
- 在线: 39.2小时
- 虫号: 2330746
- 注册: 2013-03-08
- 专业: 病原微生物变异与耐药
|
您好！我是江西南昌大学医学院的一名在读研究生，目前在构建原核表达载体，由于表达的目的基因含有较多的稀有密码子，前期在BL21(DE3)plysS中诱导不出。在论坛里看到您有Rosetta菌株，请问能否赠送一些给我，在本人论文及发表的文章中我会标出菌株来源。或者可以以我现有的质粒和菌株与您交换，我实验室现有pet28c，32a，pet41,DH5a,BL21,BL21(DE3),BL21(DE3)plysS。期待您的回复！谢谢！联系邮箱：gsxiang1990@sina.com 发自小木虫Android客户端 |
6楼2016-04-29 10:24:45
|
本帖内容被屏蔽 |
7楼2021-03-08 22:15:17
5