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小龙女豆豆

新虫 (正式写手)

[求助] 想请教关于构建cDNA文库和测某一基因序列的问题。

想请教关于构建cDNA文库和测某一基因序列的问题。
1.构建cDNA文库,比如说想构建人的皮肤组织cDNA文库,怎么做?
2.构建了文库之后,通过primer walking的方法进行质粒测通,然后就获得了某一基因序列。(中间有EST序列...不太懂),这是怎样的一个过程?
请大神们能给我讲讲轮廓即可,不需要具体实施步骤。急切等待回复
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wangzhongyu

铁虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 小龙女豆豆 at 2014-08-24 16:42:38
开始先做的建库,然后才有的基因。我不知道我现在的基因是怎么从文库里来的...

自己提取RNA,逆转录成cDNA文库就可以。
4楼2014-08-25 22:31:31
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wangzhongyu

铁虫 (小有名气)

对于有目的基因序列的不用建文库。直接扩增目的基因

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
2楼2014-08-23 17:13:17
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小龙女豆豆

新虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by wangzhongyu at 2014-08-23 17:13:17
对于有目的基因序列的不用建文库。直接扩增目的基因

开始先做的建库,然后才有的基因。我不知道我现在的基因是怎么从文库里来的
3楼2014-08-24 16:42:38
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