应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 核酸提取 » DNA提取质量与DNA模板浓度问题
141/2返回列表12下一页
查看: 4417  |  回复: 13
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

lzbull

木虫 (小有名气)

[求助] DNA提取质量与DNA模板浓度问题 已有6人参与

小弟新手做分子，提了些DNA，有些问题还想请教一下大家。
从材料中提了DNA，跑电泳亮度不高。用紫外分光光度计测了一下，如下表，浓度都不高。而且有个问题是260/230有些出现负值，这个是怎么回事？这样DNA还能用来做模板进行PCR吗？主要是材料现在没有了，也不好重弄。
再有一个问题是一般做PCR的话DNA模板浓度最少是多少就可以了？比如说20ul体系至少加多少纳克DNA模板？
谢谢大家了。
DNA提取质量与DNA模板浓度问题
dna.png
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2014-02-27 15:16:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

atlanticwi

金虫 (正式写手)

琴美喜欢发呆 不喜欢发脾气
★ ★ ★
kx444555: 金币+3, 鼓励交流 2014-02-28 11:49:19
....
    不知你用的什么方法，什么材料。
    如果你用CTAB法，针对普通（不含过量多酚、多脂肪类）植物材料的话，我的推断如下。
    仅从数值上来看，260/280过低，你抽提过程有问题，可能吸到有机相了，260/280过低，75%乙醇洗过后没有晾干净。
    材料出来的浓度是次要，你质量不过关的话，做PCR怎么都费劲。
    个人见解，欢迎高手指点，预祝实验顺利
赞一下(1人) 回复此楼
Let God do with it as He wills
3楼2014-02-27 15:22:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jackhua17

禁虫 (小有名气)
★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
lzbull: 金币+3, ★★★很有帮助, 非常感谢。 2014-03-02 14:08:19
本帖内容被屏蔽
9楼2014-03-02 06:13:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

HYZ221314

至尊木虫 (职业作家)

优秀版主

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
lzbull: 金币+2, ★有帮助, 谢谢 2014-02-27 21:06:51
我一般20ul加一百纳克左右；可以试试进行PCR，具体原因不知道

[ 发自小木虫客户端 ]
赞一下 回复此楼
青山不断，绿水长流
2楼2014-02-27 15:20:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lzbull

木虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by atlanticwi at 2014-02-27 15:22:35
....
    不知你用的什么方法，什么材料。
    如果你用CTAB法，针对普通（不含过量多酚、多脂肪类）植物材料的话，我的推断如下。
    仅从数值上来看，260/280过低，你抽提过程有问题，可能吸到有机相了，260/ ...

谢谢。我是用试剂盒提取的。乙醇洗过后在通风橱里晾了10分钟。应该差不多了吧，说明书上写的数分钟即可。
赞一下 回复此楼
4楼2014-02-27 21:08:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lzbull

木虫 (小有名气)
求教。
回复此楼
5楼2014-02-28 09:05:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lzbull

木虫 (小有名气)
求指导
回复此楼
6楼2014-02-28 14:21:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lvbobo823

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
lzbull: 金币+5, ★★★很有帮助, 非常感谢 2014-03-01 22:53:24
你稍微取些样跑个琼脂糖胶看看，我听卖试剂盒的说用试剂盒中buffer洗脱的DNA测浓度不准。PCR 20微升体系百十纳克DNA就好。
赞一下 回复此楼
hehe
7楼2014-02-28 21:02:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lzbull

木虫 (小有名气)
引用回帖:
7楼: Originally posted by lvbobo823 at 2014-02-28 21:02:52
你稍微取些样跑个琼脂糖胶看看，我听卖试剂盒的说用试剂盒中buffer洗脱的DNA测浓度不准。PCR 20微升体系百十纳克DNA就好。

谢谢。我跑过电泳，亮度确实不高。百十纳克大概是多少？20微升体系10~20纳克够吗？
赞一下 回复此楼
8楼2014-03-01 22:53:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wangguosing

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
引用回帖:
4楼: Originally posted by lzbull at 2014-02-27 21:08:23
谢谢。我是用试剂盒提取的。乙醇洗过后在通风橱里晾了10分钟。应该差不多了吧，说明书上写的数分钟即可。...

我觉得干燥是去除乙醇，十多分钟就够，

[ 发自小木虫客户端 ]
赞一下 回复此楼
10楼2014-03-02 07:20:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 lzbull 的主题更新
141/2返回列表12下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[博后之家] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +5 Aj1rhIDL5ixY 2026-09-14 5/250 2026-09-17 05:14 by k06BKNblrGRH
[考博] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +4 Aj1rhIDL5ixY 2026-09-14 5/250 2026-09-17 05:14 by k06BKNblrGRH
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +4 Aj1rhIDL5ixY 2026-09-14 4/200 2026-09-17 04:52 by k06BKNblrGRH
[公派出国] 售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +4 40ms4Wlo4umh 2026-09-14 4/200 2026-09-17 04:26 by k06BKNblrGRH
[博后之家] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +4 40ms4Wlo4umh 2026-09-14 4/200 2026-09-17 04:26 by k06BKNblrGRH
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +3 40ms4Wlo4umh 2026-09-14 3/150 2026-09-17 04:16 by k06BKNblrGRH
[硕博家园] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +5 40ms4Wlo4umh 2026-09-14 5/250 2026-09-17 04:14 by k06BKNblrGRH
[博后之家] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +3 LwdutQ8HoqWP 2026-09-13 3/150 2026-09-17 02:02 by Tql5LQhh5rLK
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +7 3n8v2C8RimXI 2026-09-13 8/400 2026-09-17 01:38 by Tql5LQhh5rLK
[博后之家] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +4 vZfe6xYu34yj 2026-09-14 4/200 2026-09-16 22:40 by Tql5LQhh5rLK
[考研] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +3 vZfe6xYu34yj 2026-09-14 3/150 2026-09-16 22:26 by Tql5LQhh5rLK
[硕博家园] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +3 yaCh4X3wd045 2026-09-14 3/150 2026-09-16 20:39 by MHf40yA0Uhyb
[考研] 售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +7 QUjhNVAcOSff 2026-09-13 8/400 2026-09-16 18:37 by rRvxEj3zorCy
[博后之家] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +5 QUjhNVAcOSff 2026-09-13 5/250 2026-09-16 14:39 by i3KBRD19ERkG
[考博] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +5 3n8v2C8RimXI 2026-09-13 5/250 2026-09-16 02:50 by DgNGHc3h5tPl
[考博] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +7 s3fFTmArrBt6 2026-09-14 7/350 2026-09-15 16:23 by CgyNCDVNhGVg
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +3 23jxep3nCNZb 2026-09-14 3/150 2026-09-15 09:38 by VMDqgnlKimtZ
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +4 6F5UbRU2I5hL 2026-09-14 4/200 2026-09-15 08:02 by C79jjtjAKjEn
[教师之家] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +3 s3fFTmArrBt6 2026-09-14 3/150 2026-09-15 07:46 by C79jjtjAKjEn
[教师之家] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +6 3n8v2C8RimXI 2026-09-13 6/300 2026-09-15 05:38 by 5BDX0d0WFp7t
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭