应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 核酸提取 » DNA提取质量与DNA模板浓度问题
51/1返回列表
查看: 3858  |  回复: 13
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

lzbull

木虫 (小有名气)

[求助] DNA提取质量与DNA模板浓度问题 已有6人参与

小弟新手做分子，提了些DNA，有些问题还想请教一下大家。
从材料中提了DNA，跑电泳亮度不高。用紫外分光光度计测了一下，如下表，浓度都不高。而且有个问题是260/230有些出现负值，这个是怎么回事？这样DNA还能用来做模板进行PCR吗？主要是材料现在没有了，也不好重弄。
再有一个问题是一般做PCR的话DNA模板浓度最少是多少就可以了？比如说20ul体系至少加多少纳克DNA模板？
谢谢大家了。
DNA提取质量与DNA模板浓度问题
dna.png
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2014-02-27 15:16:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lzbull

木虫 (小有名气)
引用回帖:
7楼: Originally posted by lvbobo823 at 2014-02-28 21:02:52
你稍微取些样跑个琼脂糖胶看看，我听卖试剂盒的说用试剂盒中buffer洗脱的DNA测浓度不准。PCR 20微升体系百十纳克DNA就好。

谢谢。我跑过电泳，亮度确实不高。百十纳克大概是多少？20微升体系10~20纳克够吗？
赞一下 回复此楼
8楼2014-03-01 22:53:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 14 个回答

HYZ221314

至尊木虫 (职业作家)

优秀版主

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
lzbull: 金币+2, ★有帮助, 谢谢 2014-02-27 21:06:51
我一般20ul加一百纳克左右；可以试试进行PCR，具体原因不知道

[ 发自小木虫客户端 ]
赞一下 回复此楼
青山不断，绿水长流
2楼2014-02-27 15:20:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

atlanticwi

金虫 (正式写手)

琴美喜欢发呆 不喜欢发脾气
★ ★ ★
kx444555: 金币+3, 鼓励交流 2014-02-28 11:49:19
....
    不知你用的什么方法，什么材料。
    如果你用CTAB法，针对普通（不含过量多酚、多脂肪类）植物材料的话，我的推断如下。
    仅从数值上来看，260/280过低，你抽提过程有问题，可能吸到有机相了，260/280过低，75%乙醇洗过后没有晾干净。
    材料出来的浓度是次要，你质量不过关的话，做PCR怎么都费劲。
    个人见解，欢迎高手指点，预祝实验顺利
赞一下(1人) 回复此楼
Let God do with it as He wills
3楼2014-02-27 15:22:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lzbull

木虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by atlanticwi at 2014-02-27 15:22:35
....
    不知你用的什么方法，什么材料。
    如果你用CTAB法，针对普通（不含过量多酚、多脂肪类）植物材料的话，我的推断如下。
    仅从数值上来看，260/280过低，你抽提过程有问题，可能吸到有机相了，260/ ...

谢谢。我是用试剂盒提取的。乙醇洗过后在通风橱里晾了10分钟。应该差不多了吧，说明书上写的数分钟即可。
赞一下 回复此楼
4楼2014-02-27 21:08:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 14 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭