24小时热门版块排行榜    

查看: 4356  |  回复: 13
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

lzbull

木虫 (小有名气)

[求助] DNA提取质量与DNA模板浓度问题 已有6人参与

小弟新手做分子,提了些DNA,有些问题还想请教一下大家。
从材料中提了DNA,跑电泳亮度不高。用紫外分光光度计测了一下,如下表,浓度都不高。而且有个问题是260/230有些出现负值,这个是怎么回事?这样DNA还能用来做模板进行PCR吗?主要是材料现在没有了,也不好重弄。
再有一个问题是一般做PCR的话DNA模板浓度最少是多少就可以了?比如说20ul体系至少加多少纳克DNA模板?
谢谢大家了。
DNA提取质量与DNA模板浓度问题
dna.png
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lzbull

木虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by atlanticwi at 2014-02-27 15:22:35
....
    不知你用的什么方法,什么材料。
    如果你用CTAB法,针对普通(不含过量多酚、多脂肪类)植物材料的话,我的推断如下。
    仅从数值上来看,260/280过低,你抽提过程有问题,可能吸到有机相了,260/ ...

谢谢。我是用试剂盒提取的。乙醇洗过后在通风橱里晾了10分钟。应该差不多了吧,说明书上写的数分钟即可。
4楼2014-02-27 21:08:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 14 个回答

HYZ221314

至尊木虫 (职业作家)

优秀版主

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
lzbull: 金币+2, 有帮助, 谢谢 2014-02-27 21:06:51
我一般20ul加一百纳克左右;可以试试进行PCR,具体原因不知道

[ 发自小木虫客户端 ]
青山不断,绿水长流
2楼2014-02-27 15:20:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

atlanticwi

金虫 (正式写手)

琴美喜欢发呆 不喜欢发脾气

★ ★ ★
kx444555: 金币+3, 鼓励交流 2014-02-28 11:49:19
....
    不知你用的什么方法,什么材料。
    如果你用CTAB法,针对普通(不含过量多酚、多脂肪类)植物材料的话,我的推断如下。
    仅从数值上来看,260/280过低,你抽提过程有问题,可能吸到有机相了,260/280过低,75%乙醇洗过后没有晾干净。
    材料出来的浓度是次要,你质量不过关的话,做PCR怎么都费劲。
    个人见解,欢迎高手指点,预祝实验顺利
Let God do with it as He wills
3楼2014-02-27 15:22:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lvbobo823

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
lzbull: 金币+5, ★★★很有帮助, 非常感谢 2014-03-01 22:53:24
你稍微取些样跑个琼脂糖胶看看,我听卖试剂盒的说用试剂盒中buffer洗脱的DNA测浓度不准。PCR 20微升体系百十纳克DNA就好。
hehe
7楼2014-02-28 21:02:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 面上函评意见出来了,像什么等级? 20+4 Tsingking1 2026-08-27 17/850 2026-09-01 19:51 by 超级无敌华子
[基金申请] 学科评审组评审是指会评吗? +4 瞬息宇宙 2026-08-31 4/200 2026-09-01 14:58 by jiaoxg
[基金申请] 为什么资助数各大高校都创新高,自己申请怎么就这么难 +13 Kittylucky 2026-08-27 14/700 2026-09-01 11:06 by feng6531
[论文投稿] 小白求助 投论文要求的highlights应该如何写 5+3 l1963982152 2026-08-29 4/200 2026-09-01 09:04 by 北京莱茵编辑
[基金申请] 麻烦专家们看看评委们的意见(F口面上) +7 gdd2018 2026-08-28 12/600 2026-09-01 08:32 by 尼古拉斯小虫
[基金申请] 怎么看青基中了没有啊 +6 叶九微 2026-08-26 6/300 2026-08-31 23:54 by yudaoqian88
[基金申请] 基金未中,这种答复是模板吗? +6 zhaosm1982 2026-08-27 7/350 2026-08-31 21:18 by qdxxmc
[基金申请] 面上意见出来了 +12 黄鸟于飞Chao 2026-08-29 23/1150 2026-08-31 18:57 by 黄鸟于飞Chao
[基金申请] 能否申诉? +7 echo8914667 2026-08-30 8/400 2026-08-31 17:00 by yihongxu
[基金申请] 中青基了要发朋友圈吗? +7 349506619 2026-08-28 7/350 2026-08-31 13:39 by 冼亮淀粉酶
[基金申请] 29号明天会评吗 +4 笨笨唐 2026-08-28 4/200 2026-08-31 09:30 by huixian257
[基金申请] 基金不中,共勉 +12 eulota 2026-08-26 12/600 2026-08-31 08:42 by ZJTJZ
[基金申请] 为什么到现在没收到通知? +5 tannykie 2026-08-29 5/250 2026-08-30 21:05 by purplejack
[基金申请] 国自然面上复盘~欢迎讨论 (金币+15) +15 晴天加油 2026-08-26 16/800 2026-08-29 18:28 by symmetry
[基金申请] 国自然评审意见 +13 wangmingqi 2026-08-28 19/950 2026-08-29 10:22 by Poppy1104
[基金申请] 2026年叶企孙基金 +4 bud_bud 2026-08-27 7/350 2026-08-29 07:23 by foolishmani
[基金申请] 为什么 国际(地区)合作与交流项目 没有放榜? 10+3 majunge000 2026-08-26 11/550 2026-08-27 08:42 by 北京莱茵编辑
[基金申请] 国合里面能看到了 +7 一怀馨秋 2026-08-26 7/350 2026-08-26 11:23 by zhaosm1982
[基金申请] 系统进不去 +4 yanglien 2026-08-26 5/250 2026-08-26 11:10 by wenfengw83
[基金申请] 国合可查了 +3 paperzjh 2026-08-26 3/150 2026-08-26 10:41 by LemmonTr
信息提示
请填处理意见