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chaojiangtao银虫 (小有名气)
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DNA降解是否会提高DNA浓度呢?求解(请参考我的实验情况)
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第一阶段: 今天做凝胶回收,用TianGen琼脂糖凝胶回收试剂盒,按照说明进行了操作。 最后用洗脱缓冲液EB洗脱的时候,脑子一抽,EB加多了,加了80ul. 用分光度计测其浓度多数都在3ng/ul, OD260/OD280均在1.0左右徘徊(与说明书上的1.7~1.9之间差别比较大)。 怀着侥幸的心理,跑下电泳,看能否出来想要的条带,16个样品,只看到了2条弱弱的目的条带。伤心! 第二阶段: 有同事建议,可以对样品用真空离心烘干机蒸发一下洗脱缓冲液EB,提高下浓度,或许就可以了。 听了建议,让1.5ml离心管放入真空离心烘干机中(条件30度以下,低速旋转),烘干了2个小时,剩下的液体样品,用分光光度计测了一下,浓度多数都在120ng/ul. OD260/OD280的比值,也上升到1.5左右,虽然与说明书的有差别,但还能接受。为了验证是否有目的条带,就跑了一板电泳,懵了,啥条带也没有。 这是咋回事呢?求解 情况介绍1: 样品烘干前液体体积与烘干后液体体积的比值为4:1。浓度提升的比例达到了40倍,有点不可思议。怀疑,但又不敢确定。 哪位同学碰到这种情况了,帮忙解释下,拜谢了!! |
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