应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 为什么我的DNA 非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳 跑成这个鬼样？
131/2返回列表12下一页
查看: 4891  |  回复: 12
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

porphybaby

金虫 (正式写手)

[求助] 为什么我的DNA 非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳 跑成这个鬼样？

如图所示。

最左边是 一个突变的单链DNA序列 是呈单链结构的 含27个碱基

第二个是 经过退火的一个四链体DNA序列 呈G-四链体结构 也含27个碱基

再往右边走 它们都是加了我的药物处理的DNA 可是会发现 根本就没有条带 跑都跑不出来？？这是怎么回事？ 所用的药物浓度与DNA的比例倍数是1,2，3，4、、、8

在4度下 TBE缓冲液中 80V 电泳 2.5小时 然后银染 的 结果

我想问下 为啥 条带都没有了呢？？？？

DNA电泳图.jpg
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2013-01-21 16:56:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖置顶 ( 共有1个 )

cdl007

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
amisking: 金币+2, 鼓励发帖交流问题。 2013-01-21 20:20:04
amisking: 回帖置顶 2013-01-21 20:20:07
DNA降解？
看你样品顺序，药越多，条带越差，你的药物怎么作用的DNA啊？
好像把条带稀释了的样子，是不是与上样缓冲液有关？
赞一下(1人) 回复此楼
2楼2013-01-21 17:15:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

mzhyan

至尊木虫 (文坛精英)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
感觉不对啊，很乱啊，是不是药物给污染了。
赞一下 回复此楼
3楼2013-01-21 17:47:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

porphybaby

金虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by cdl007 at 2013-01-21 17:15:59
DNA降解？
看你样品顺序，药越多，条带越差，你的药物怎么作用的DNA啊？
好像把条带稀释了的样子，是不是与上样缓冲液有关？

就是 可能是 插入DNA啊 或者是 跟DNA的沟槽结合咯~~

理论上它会促进 不同构型的 DNA 转换

但 按理来说 应该有条带啊 就是没有 怎么做都没有。。。
赞一下 回复此楼
4楼2013-01-21 21:48:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

porphybaby

金虫 (正式写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by mzhyan at 2013-01-21 17:47:00
感觉不对啊，很乱啊，是不是药物给污染了。

应该不是吧。。。其实我也不知怎么回事 反正就是做不出来
赞一下 回复此楼
5楼2013-01-21 21:48:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cdl007

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
小丹木木: 金币+3, 专家考核, 辛苦 2013-01-23 16:01:40
觉的你样品提取的有问题，或者确实药物将DNA降解了，还有，从你泳道口的残痕判断，从你加药开始的几个条带就有问题，加样孔残留过多，上下贯穿的黑条带，排除电泳问题的话，应该是DNA不规则碎片，各种长度都有，所以有长的带，后面随药物浓度加大，似乎dna完全被降解，跑出泳道了，

建议重新提取样品，采用新的试剂体系和电泳体系，如果还是同样问题，很可能你的药不止嵌合DNA，而且是将其降解，药物浓度越大，降解越彻底。

不知道其它虫友怎么解释
赞一下 回复此楼
6楼2013-01-22 14:20:34
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhang881007

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
药品干净吗,会不会把你的DNA降解了？？
赞一下 回复此楼
shine
7楼2013-01-22 16:07:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

porphybaby

金虫 (正式写手)
引用回帖:
6楼: Originally posted by cdl007 at 2013-01-22 14:20:34
觉的你样品提取的有问题，或者确实药物将DNA降解了，还有，从你泳道口的残痕判断，从你加药开始的几个条带就有问题，加样孔残留过多，上下贯穿的黑条带，排除电泳问题的话，应该是DNA不规则碎片，各种长度都有，所以 ...

我今天留意了一下。

发现是我药物浓度高的时候，它会让DNA发生沉淀的现象。

我直接可以在上样孔中看到那些有色的颗粒，它们是进不了胶的，只有溴酚蓝那些才在走，其他的电泳完了还依然在孔里，在孔中可以看到那些加了药物后的黄黄绿绿的沉淀。而银染之后 就整个泳道是干干净净的 什么都没有

但是 我后来降低药物浓度再做了 发现还是不行 它虽然是有条带跑出来 但是 依然是完全大拖尾 从孔中一直拖到前沿 没有形成 规整的 一个个的 条带
赞一下 回复此楼
8楼2013-01-22 23:46:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cdl007

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

看你后面的意思还是有大拖尾，我觉的还是降解，，，

不过你有没有跑分辨低一点的琼脂糖凝胶电泳？琼脂糖那个不能出条带的话，百分百降解
琼脂糖的能出条带的话就麻烦了，
赞一下 回复此楼
9楼2013-01-23 17:21:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

porphybaby

金虫 (正式写手)
再试试看吧，实在不行的话我就干脆不做这个实验了。
赞一下 回复此楼
10楼2013-01-23 22:14:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 porphybaby 的主题更新
131/2返回列表12下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[硕博家园] 上海工程技术大学 激光智能制造课题组 2027级博士研究生招生 +5 oxidpl 2026-09-20 7/350 2026-09-27 10:43 by Equinoxhua
[博后之家] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +3 ViqFlLSxHDGt 2026-09-26 3/150 2026-09-27 10:42 by 4IW0sJvtEqX8
[找工作] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +3 ViqFlLSxHDGt 2026-09-26 3/150 2026-09-27 10:26 by 4IW0sJvtEqX8
[公派出国] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +3 ViqFlLSxHDGt 2026-09-26 3/150 2026-09-27 10:15 by 4IW0sJvtEqX8
[考博] 售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 ViqFlLSxHDGt 2026-09-26 3/150 2026-09-27 10:03 by 4IW0sJvtEqX8
[考博] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 oeyPlfmMUpOC 2026-09-26 3/150 2026-09-27 09:13 by 4IW0sJvtEqX8
[公派出国] 售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 GxESXJmptOtQ 2026-09-25 4/200 2026-09-27 06:44 by XgCC8uTcwILl
[论文投稿] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 GxESXJmptOtQ 2026-09-25 4/200 2026-09-27 06:39 by XgCC8uTcwILl
[找工作] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +3 vQZoDrrm7mUF 2026-09-25 3/150 2026-09-27 06:08 by XgCC8uTcwILl
[公派出国] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +3 vQZoDrrm7mUF 2026-09-25 3/150 2026-09-27 06:05 by XgCC8uTcwILl
[考研] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +3 vQZoDrrm7mUF 2026-09-25 3/150 2026-09-27 05:56 by XgCC8uTcwILl
[论文投稿] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +4 vQZoDrrm7mUF 2026-09-25 4/200 2026-09-27 05:56 by XgCC8uTcwILl
[找工作] 售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +5 vQZoDrrm7mUF 2026-09-25 5/250 2026-09-27 05:53 by XgCC8uTcwILl
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +3 vQZoDrrm7mUF 2026-09-25 5/250 2026-09-27 05:44 by XgCC8uTcwILl
[公派出国] 售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 vQZoDrrm7mUF 2026-09-25 4/200 2026-09-27 05:44 by XgCC8uTcwILl
[考博] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +3 vQZoDrrm7mUF 2026-09-25 3/150 2026-09-27 05:44 by XgCC8uTcwILl
[论文投稿] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +3 vQZoDrrm7mUF 2026-09-25 6/300 2026-09-27 05:42 by XgCC8uTcwILl
[找工作] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +4 PGTSwSC3F6nQ 2026-09-24 5/250 2026-09-25 11:19 by yhq9807
[公派出国] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 PGTSwSC3F6nQ 2026-09-24 7/350 2026-09-25 11:18 by yhq9807
[基金申请] 师弟论文见刊大半年才想起来申请专利，还能抢救一下吗？ +4 13108017953 2026-09-21 4/200 2026-09-24 10:06 by kudofaye
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭