应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » DNA降解是否会提高DNA浓度呢？求解（请参考我的实验情况）
81/1返回列表
查看: 2385  |  回复: 7
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

chaojiangtao

银虫 (小有名气)

[求助] DNA降解是否会提高DNA浓度呢？求解（请参考我的实验情况）

第一阶段：
今天做凝胶回收，用TianGen琼脂糖凝胶回收试剂盒，按照说明进行了操作。
最后用洗脱缓冲液EB洗脱的时候，脑子一抽，EB加多了，加了80ul.
用分光度计测其浓度多数都在3ng/ul, OD260/OD280均在1.0左右徘徊（与说明书上的1.7~1.9之间差别比较大）。
怀着侥幸的心理，跑下电泳，看能否出来想要的条带，16个样品，只看到了2条弱弱的目的条带。伤心！

第二阶段：
有同事建议，可以对样品用真空离心烘干机蒸发一下洗脱缓冲液EB，提高下浓度，或许就可以了。
听了建议，让1.5ml离心管放入真空离心烘干机中（条件30度以下，低速旋转），烘干了2个小时，剩下的液体样品，用分光光度计测了一下，浓度多数都在120ng/ul.  OD260/OD280的比值，也上升到1.5左右，虽然与说明书的有差别，但还能接受。为了验证是否有目的条带，就跑了一板电泳，懵了，啥条带也没有。
这是咋回事呢？求解

情况介绍1： 样品烘干前液体体积与烘干后液体体积的比值为4:1。浓度提升的比例达到了40倍，有点不可思议。怀疑，但又不敢确定。

哪位同学碰到这种情况了，帮忙解释下，拜谢了！！
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
徒步行走
1楼 2013-05-31 16:44:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

starseacow

专家顾问 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
wizardfan: 金币+2, 说的在理 2013-06-02 09:14:22
分光光度计检测并不可靠，测出的吸光度值可能是其他杂质，你看到的浓度比例提升可能就是因为这个。有没有DNA，还是以电泳条带为准。
赞一下(1人) 回复此楼
植物生理群69993869，为避免广告，申请加入请提供木虫昵称，院校及专业信息
2楼2013-05-31 21:15:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

bullfrog325

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
wizardfan: 金币+2, 谢谢参与 2013-06-02 09:17:08
真空浓缩后盐的浓度上升不少, 这些都会贡献"浓度"读数.
赞一下 回复此楼
3楼2013-06-01 00:49:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

chaojiangtao

银虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by bullfrog325 at 2013-06-01 00:49:45
真空浓缩后盐的浓度上升不少, 这些都会贡献"浓度"读数.

首先谢谢你的帮助
盐浓度应该会提升四倍。能贡献这么多的浓度指数吗？
30℃浓缩后了2个多小时，会不会让回收到的DNA降解呢？
赞一下 回复此楼
徒步行走
4楼2013-06-01 09:41:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

chaojiangtao

银虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by starseacow at 2013-05-31 21:15:20
分光光度计检测并不可靠，测出的吸光度值可能是其他杂质，你看到的浓度比例提升可能就是因为这个。有没有DNA，还是以电泳条带为准。

30℃浓缩后了2个多小时，会不会让回收到的DNA降解呢？
赞一下 回复此楼
徒步行走
5楼2013-06-01 09:41:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wchuangqi

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
chaojiangtao: 金币+5, ★有帮助, 2 2013-06-01 20:11:31
原因只有一个，就是你的回收试剂盒质量不行。我原来也用这个牌子的，后来发生了几次这样的事故，每次回收最后浓度都在5ng以下。就果断放弃这个牌子的。国产的话，我建议使用全式金的，或者上海生工的。
赞一下 回复此楼
天道酬勤
6楼2013-06-01 14:08:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

starseacow

专家顾问 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
chaojiangtao: 金币+5, ★★★很有帮助 2013-06-01 20:12:36
引用回帖:
5楼: Originally posted by chaojiangtao at 2013-06-01 09:41:57
30℃浓缩后了2个多小时，会不会让回收到的DNA降解呢？...

很有可能，如果DNA降解了的话，分光光度计测出来的值也会很大
赞一下 回复此楼
植物生理群69993869，为避免广告，申请加入请提供木虫昵称，院校及专业信息
7楼2013-06-01 16:01:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

grape_vine

金虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by chaojiangtao at 2013-06-01 09:41:23
首先谢谢你的帮助
盐浓度应该会提升四倍。能贡献这么多的浓度指数吗？
30℃浓缩后了2个多小时，会不会让回收到的DNA降解呢？...

不会！
回复此楼
8楼2013-09-12 16:41:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 chaojiangtao 的主题更新
81/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 318求调剂 +3 Yanyali 2026-03-15 3/150 2026-03-16 16:41 by houyaoxu
[考研] 0703化学调剂 +6 妮妮ninicgb 2026-03-15 9/450 2026-03-16 16:40 by houyaoxu
[考研] 285求调剂 +6 ytter 2026-03-12 6/300 2026-03-16 15:05 by njzyff
[考研] 277材料科学与工程080500求调剂 +3 自由煎饼果子 2026-03-16 3/150 2026-03-16 14:10 by 运气yunqi
[考研] 材料工程专硕274一志愿211求调剂 +5 薛云鹏 2026-03-15 5/250 2026-03-15 20:38 by Logic2024
[考研] 268求调剂 +5 一定有学上- 2026-03-14 6/300 2026-03-14 22:20 by 运气yunqi
[考研] 材料与化工（0856）304求B区调剂 +7 邱gl 2026-03-10 11/550 2026-03-14 12:18 by 邱gl
[考研] 【0703化学调剂】-一志愿华中师范大学-六级475 +5 Becho359 2026-03-11 5/250 2026-03-14 11:35 by 哦哦123
[考研] 一志愿华中农业大学071010，总分三百二,求调剂 +3 困困困困坤坤 2026-03-10 3/150 2026-03-14 00:35 by JourneyLucky
[考研] 318求调剂 +3 李新光 2026-03-10 3/150 2026-03-14 00:21 by JourneyLucky
[考研] 材料工程,326分，求调剂 +6 KRSLSR 2026-03-10 6/300 2026-03-13 23:47 by JourneyLucky
[考研] 材料与化工（0856）304求B区调剂 +6 邱gl 2026-03-12 7/350 2026-03-13 23:24 by 邱gl
[考研] 求调剂（材料与化工327） +4 爱吃香菜啦 2026-03-11 4/200 2026-03-13 22:11 by JourneyLucky
[考研] 293求调剂 +3 世界首富 2026-03-11 3/150 2026-03-13 16:27 by JourneyLucky
[考研] 302求调剂 +6 负心者当诛 2026-03-11 6/300 2026-03-13 16:11 by JourneyLucky
[考研] 一志愿211化学学硕310分求调剂 +8 努力奋斗112 2026-03-12 9/450 2026-03-13 15:41 by JourneyLucky
[考研] 求调剂 +3 程雨杭 2026-03-12 3/150 2026-03-13 15:06 by JourneyLucky
[考研] 308求调剂 +3 是Lupa啊 2026-03-12 3/150 2026-03-13 14:30 by 求调剂zz
[论文投稿] 投稿问题 5+4 星光灿烂xt 2026-03-12 6/300 2026-03-13 14:17 by god_tian
[考研] 277求调剂 +4 anchor17 2026-03-12 4/200 2026-03-13 11:15 by 白夜悠长
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭