24小时热门版块排行榜    

北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
查看: 2426  |  回复: 7
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

chaojiangtao

银虫 (小有名气)

[求助] DNA降解是否会提高DNA浓度呢?求解(请参考我的实验情况)

第一阶段:
今天做凝胶回收,用TianGen琼脂糖凝胶回收试剂盒,按照说明进行了操作。
最后用洗脱缓冲液EB洗脱的时候,脑子一抽,EB加多了,加了80ul.
用分光度计测其浓度多数都在3ng/ul, OD260/OD280均在1.0左右徘徊(与说明书上的1.7~1.9之间差别比较大)。
怀着侥幸的心理,跑下电泳,看能否出来想要的条带,16个样品,只看到了2条弱弱的目的条带。伤心!

第二阶段:
有同事建议,可以对样品用真空离心烘干机蒸发一下洗脱缓冲液EB,提高下浓度,或许就可以了。
听了建议,让1.5ml离心管放入真空离心烘干机中(条件30度以下,低速旋转),烘干了2个小时,剩下的液体样品,用分光光度计测了一下,浓度多数都在120ng/ul.  OD260/OD280的比值,也上升到1.5左右,虽然与说明书的有差别,但还能接受。为了验证是否有目的条带,就跑了一板电泳,懵了,啥条带也没有。
这是咋回事呢?求解

情况介绍1: 样品烘干前液体体积与烘干后液体体积的比值为4:1。浓度提升的比例达到了40倍,有点不可思议。怀疑,但又不敢确定。

哪位同学碰到这种情况了,帮忙解释下,拜谢了!!
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

徒步行走
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

chaojiangtao

银虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by bullfrog325 at 2013-06-01 00:49:45
真空浓缩后盐的浓度上升不少, 这些都会贡献"浓度"读数.

首先谢谢你的帮助
盐浓度应该会提升四倍。能贡献这么多的浓度指数吗?
30℃浓缩后了2个多小时,会不会让回收到的DNA降解呢?
徒步行走
4楼2013-06-01 09:41:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 8 个回答

starseacow

专家顾问 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
wizardfan: 金币+2, 说的在理 2013-06-02 09:14:22
分光光度计检测并不可靠,测出的吸光度值可能是其他杂质,你看到的浓度比例提升可能就是因为这个。有没有DNA,还是以电泳条带为准。
植物生理群69993869,为避免广告,申请加入请提供木虫昵称,院校及专业信息
2楼2013-05-31 21:15:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

bullfrog325

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
wizardfan: 金币+2, 谢谢参与 2013-06-02 09:17:08
真空浓缩后盐的浓度上升不少, 这些都会贡献"浓度"读数.
3楼2013-06-01 00:49:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

chaojiangtao

银虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by starseacow at 2013-05-31 21:15:20
分光光度计检测并不可靠,测出的吸光度值可能是其他杂质,你看到的浓度比例提升可能就是因为这个。有没有DNA,还是以电泳条带为准。

30℃浓缩后了2个多小时,会不会让回收到的DNA降解呢?
徒步行走
5楼2013-06-01 09:41:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 362求调剂 +7 我要考大 2026-04-06 11/550 2026-04-07 09:32 by 我要考大
[考研] 22408 调剂材料 +6 我叫ez 2026-04-06 7/350 2026-04-07 09:04 by MW_WTU
[考研] 290求调剂085701 +11 1314捧花 2026-04-02 11/550 2026-04-06 13:31 by zllcz
[考研] 0855求调剂材料 +11 红桃灼灼 2026-04-04 12/600 2026-04-06 10:26 by 蓝云思雨
[考研] 求调剂,一志愿郑州大学材料与化工专硕,英二数二342分,求老师收留 +19 v12abo 2026-04-02 21/1050 2026-04-06 09:29 by 蓝云思雨
[考研] 一志愿西安交大材料学硕(英一数二)347,求调剂到高分子/材料相关专业 +8 zju51 2026-03-31 10/500 2026-04-06 09:03 by 醉翁wl
[考研] 341求调剂 +3 学无止境,冲 2026-04-05 3/150 2026-04-05 09:40 by lbsjt
[考研] 290求调剂 +7 luoziheng 2026-04-04 7/350 2026-04-04 23:17 by lqwchd
[考研] 材料调剂 +10 懒羊羊轻置玉臀 2026-04-02 11/550 2026-04-04 21:56 by laoshidan
[考研] 316求调剂 +9 墨辰_Orion926 2026-04-04 9/450 2026-04-04 21:35 by lbsjt
[考研] 求调剂 +3 ffyyu 2026-04-02 3/150 2026-04-04 19:03 by 蓝云思雨
[考研] 26调剂 086003 +6 失活的细胞 2026-04-04 6/300 2026-04-04 09:50 by zhangdingwa
[考研] 数二英二348求调剂 +4 hxdzj1 2026-04-03 5/250 2026-04-03 21:25 by zhq0425
[考研] 081200-11408-276学硕求调剂 +5 崔wj 2026-04-03 5/250 2026-04-03 15:06 by arrow8852
[考研] 一志愿a区211,085601-307分求调剂 +13 党嘉豪 2026-03-31 26/1300 2026-04-03 08:33 by 495374996
[考研] 260求调剂 +6 朱芷琳 2026-04-02 6/300 2026-04-02 20:27 by 6781022
[考研] 环境工程297分求调剂一志愿杭高院 +15 GENJIOW 2026-03-31 16/800 2026-04-02 17:56 by cyh—315
[考研] 310分求调剂 +4 成功上岸wang 2026-04-01 4/200 2026-04-01 20:35 by liu823948201
[考研] 求调剂0703 +5 周嘉尧 2026-03-31 8/400 2026-04-01 20:32 by ltltkkk
[考研] 085600 一志愿9 总分351 求调剂学校 +7 czhcz 2026-03-31 9/450 2026-04-01 19:24 by 无际的草原
信息提示
请填处理意见