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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » DNA切割 如图 桥高手指点
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缥缈之佳

银虫 (小有名气)

[求助] DNA切割 如图 桥高手指点

我做的 琼脂糖凝胶电泳，如图，0是空白，只有DNA；1是加药10 -5浓度(1微升)，2是加药10 -5浓度(5微升)，3是加药10 -4浓度(1微升)，4是加药10 -4浓度(2微升)，5是加药10 -4浓度(3微升)，6是加药10 -4浓度(4微升)，7是加药10 -4浓度(5微升)，8是加药10 -4浓度(6微升)，9是加药10 -4浓度(7微升)，10是加药10 -4浓度(8微升)     我用的EB显色
如图到最后10时，已经没有条带，我的问题是，
1.这图能否说明药物具有DNA切割作用，或是与DNA的其他作用？
2.若有切割，切碎的条带为何没有显示？
3.如何将消失的谱带显示，哪个地方改进（浓度试了）？
求高手指点


[ Last edited by 缥缈之佳 on 2012-1-3 at 10:51 ]
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1楼 2012-01-02 22:03:55
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回帖置顶 ( 共有2个 )

hzlatqh

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
缥缈之佳: 回帖置顶 2012-01-04 11:16:20
西瓜(金币+5, MolEPI+1): 很好很强大！ 2012-01-04 12:22:39
1.这图能否说明药物具有DNA切割作用，或是与DNA的其他作用？

这些实验还不够，要多做对照，譬如加入同样体积buffer或者溶剂（但不含药），以排除试剂本身是否有降解DNA的污染物或者排除稀释效应。

2.若有切割，切碎的条带为何没有显示？
可能的情况是，你的药能非特异性的切割DNA，这样的话，条带大小不一，各个大小的浓度都很低，自然看不出来。

3.如何将消失的谱带显示，哪个地方改进（浓度试了）？
切割后，测定DNA的浓度或者不跑电泳，而是直接点样，染EB，看能否看到亮斑。同时用该样品平行的做一个电泳，表明原有的DNA的确被切割。
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两个黄鹂鸣翠柳，一行白鹭上青天
3楼2012-01-04 00:05:22
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缥缈之佳

银虫 (小有名气)
引用回帖:
楼: Originally posted by hzlatqh at 2012-01-04 00:05:22:
1.这图能否说明药物具有DNA切割作用，或是与DNA的其他作用？

这些实验还不够，要多做对照，譬如加入同样体积buffer或者溶剂（但不含药），以排除试剂本身是否有降解DNA的污染物或者排除稀释效应。

2.若有切 ...

第一条考虑到了   
第二三条很感谢
我会再试下的   谢谢
赞一下 回复此楼
5楼2012-01-04 11:15:49
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GWBST

金虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
小丹木木(金币+1): 鼓励应助 2012-01-03 22:00:13
缥缈之佳(金币+1): 2012-01-04 11:11:42
不能严格说明有降解的作用，也许是浓度被稀释的原因，你在同一体积在增加药物的浓度试试
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事在人为
2楼2012-01-03 21:33:29
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缥缈之佳

银虫 (小有名气)
引用回帖:
楼: Originally posted by GWBST at 2012-01-03 21:33:29:
不能严格说明有降解的作用，也许是浓度被稀释的原因，你在同一体积在增加药物的浓度试试

不可能稀释，我加了缓冲液的
赞一下 回复此楼
4楼2012-01-04 11:11:32
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