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DNA切割 如图 桥高手指点
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我做的 琼脂糖凝胶电泳，如图，0是空白，只有DNA；1是加药10 -5浓度(1微升)，2是加药10 -5浓度(5微升)，3是加药10 -4浓度(1微升)，4是加药10 -4浓度(2微升)，5是加药10 -4浓度(3微升)，6是加药10 -4浓度(4微升)，7是加药10 -4浓度(5微升)，8是加药10 -4浓度(6微升)，9是加药10 -4浓度(7微升)，10是加药10 -4浓度(8微升) 我用的EB显色 如图到最后10时，已经没有条带，我的问题是， 1.这图能否说明药物具有DNA切割作用，或是与DNA的其他作用？ 2.若有切割，切碎的条带为何没有显示？ 3.如何将消失的谱带显示，哪个地方改进（浓度试了）？ 求高手指点  [ Last edited by 缥缈之佳 on 2012-1-3 at 10:51 ] |
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5楼2012-01-04 11:15:49
GWBST
金虫 (著名写手)
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2楼2012-01-03 21:33:29
【答案】应助回帖
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缥缈之佳: 回帖置顶 2012-01-04 11:16:20
西瓜(金币+5, MolEPI+1): 很好很强大！ 2012-01-04 12:22:39
缥缈之佳: 回帖置顶 2012-01-04 11:16:20
西瓜(金币+5, MolEPI+1): 很好很强大！ 2012-01-04 12:22:39
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1.这图能否说明药物具有DNA切割作用，或是与DNA的其他作用？ 这些实验还不够，要多做对照，譬如加入同样体积buffer或者溶剂（但不含药），以排除试剂本身是否有降解DNA的污染物或者排除稀释效应。 2.若有切割，切碎的条带为何没有显示？ 可能的情况是，你的药能非特异性的切割DNA，这样的话，条带大小不一，各个大小的浓度都很低，自然看不出来。 3.如何将消失的谱带显示，哪个地方改进（浓度试了）？ 切割后，测定DNA的浓度或者不跑电泳，而是直接点样，染EB，看能否看到亮斑。同时用该样品平行的做一个电泳，表明原有的DNA的确被切割。 |
3楼2012-01-04 00:05:22
4楼2012-01-04 11:11:32
