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微生物gDNA琼脂糖凝胶电泳，问题 已有3人参与
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琼脂糖凝胶电泳结果，如附件： 问题：1、样品1出现这中情况，有没有可能是上样量太大？ 2、样品2无条带？ 3、胶出现一半白一半稍黑的现象，是因为制胶时胶槽没有放平？ 先谢谢了。  1.PNG |
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8楼2014-08-21 15:18:16
2楼2014-08-20 21:08:17
3楼2014-08-21 09:13:47
鬼羽帝魂
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4楼2014-08-21 10:29:19
5楼2014-08-21 10:37:37
鬼羽帝魂
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6楼2014-08-21 11:39:25
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1. 从你的胶来看，你的胶没有充分凝固好，胶倒完要凝固至少30min，样品1中提取的DNA质量还算可以，一半基因组DNA分子量都比较大，所以会集中在胶的上部，减少上样量，胶可能跑的会更好看 2. 泳道2的确是没有提出DNA，可能是在提取过程中DNA降解了 3. 胶一半白一半黑，我猜你用的是EB染料，EB带正电，电泳时会向正极移动，所以下面的EB往上跑了就会显得不亮，如果你用的是其他染料，如果染料带电的话，也会出现这种情况 |
7楼2014-08-21 12:30:06
9楼2014-08-21 15:30:40
gyesang
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1. 胶的厚薄根据你的梳子调整，薄胶大概1/3梳齿深，也即梳子的齿1/3插在胶中 2. 样品1，提的还好，gDNA可用，样品2没有提到DNA或者DNA降解 3. 泳道1，不一定是降解，小片段DNA的产生也可能是你在提取过程的机械损伤，这个是避免不了的，样品2前端是降解中的RNA，不是漂样 4. 胶要煮透，然后胶要充分凝固，减少上样量(Marker也是) 5. http://muchong.com/bbs/viewthread.php?tid=3771137 8楼前西瓜版主的回答 "和EB一样，GoldView电泳时会向负极移动（胶孔方向），所以电泳之后，靠近胶孔那边的背景会更亮，而另一半的胶背景会比较暗，这个是正常现象，不影响结果的。" |
10楼2014-08-21 16:00:49
