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WSXP1104

新虫 (小有名气)

[求助] 微生物gDNA琼脂糖凝胶电泳,问题已有3人参与

琼脂糖凝胶电泳结果,如附件:
问题:1、样品1出现这中情况,有没有可能是上样量太大?
           2、样品2无条带?
            3、胶出现一半白一半稍黑的现象,是因为制胶时胶槽没有放平?

先谢谢了。

微生物gDNA琼脂糖凝胶电泳,问题
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WSXP1104

新虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 考拉003 at 2014-08-20 21:08:17
1,我之前跑胶也会出现这种问题,我也觉得可能是浓度太高了,你这是点了多少样品,太高的话可以点四五微升就够了。
2.没有条带
3.你说胶配完后是一边黑还是?我还没有遇到过,如果你放在扫胶仪中一半变黑的话是因为 ...

我点了5ul样品,微生物是10的9次方级别,用100ul buffer AE 洗脱DNA。

你一般是用多少去洗脱DNA?
3楼2014-08-21 09:13:47
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考拉003

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
WSXP1104: 金币+1 2014-08-21 09:14:09
gyesang: 金币+3, 鼓励回帖交流! 2014-08-21 12:30:40
1,我之前跑胶也会出现这种问题,我也觉得可能是浓度太高了,你这是点了多少样品,太高的话可以点四五微升就够了。
2.没有条带
3.你说胶配完后是一边黑还是?我还没有遇到过,如果你放在扫胶仪中一半变黑的话是因为放置的问题,不要紧。
不是微生物专业的却进入微生物行业
2楼2014-08-20 21:08:17
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鬼羽帝魂

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流! 2014-08-21 12:30:51
WSXP1104: 金币+1, 有帮助 2014-08-21 15:25:29
胶出现一半白一半稍黑的现象,是因为制胶时胶加了EB,当你跑胶时,下面的EB就跑出去了,所以最后就没有EB了,这也是为什么跑着跑着那些Marker的小条带很模糊或者消失了的原因。
4楼2014-08-21 10:29:19
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WSXP1104

新虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by 鬼羽帝魂 at 2014-08-21 10:29:19
胶出现一半白一半稍黑的现象,是因为制胶时胶加了EB,当你跑胶时,下面的EB就跑出去了,所以最后就没有EB了,这也是为什么跑着跑着那些Marker的小条带很模糊或者消失了的原因。

我用的不是EB,我在制胶时加了Goldview I核酸染料。

80V跑了30min.
5楼2014-08-21 10:37:37
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